重组外源性人热休克蛋白70基因真核表达载体的构建及鉴定

韩世伟; 张阳德; 万小平; 陈玉祥

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重组外源性人热休克蛋白70基因真核表达载体的构建及鉴定

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背景:热休克蛋白70的肿瘤免疫作用近年来受到国内外学者的广泛关注,然而目前常用的诱导内源性热休克蛋白70表达的方法,如热应激、缺血预处理等均存在一些弊端。目的:拟构建携带并正确表达外源性人热休克蛋白70基因的重组真核表达载体。方法:外源性热休克蛋白70基因连接入真核表达载体pDC315-EGFP中,转化大肠杆菌感受态细胞,重组真核表达载体外源基因测序及PCR检测鉴定阳性克隆后转染人胚肾293细胞,荧光显微镜及western blot鉴定外源基因在细胞中的表达。结果与结论:经PCR和测序证实外源性人热休克蛋白70基因正确重组入真核表达载体pDC315-EGFP,转染293细胞后荧光显微镜观察到绿色荧光蛋白GFP的表达,Western blot检测到热休克蛋白70在293细胞中有效表达。

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来源
《中国组织工程研究》 |2010年第20期|3674-3677|共4页
作者
韩世伟; 张阳德; 万小平; 陈玉祥;
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作者单位

中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心;

中南大学卫生部纳米生物技术重点实验室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类生物医学工程;
关键词
热休克蛋白70; 真核表达载体; 基因载体; 基因重组; 基因治疗;

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