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原核表达番木瓜环斑病毒NIa-Pro及其双重酶活鉴定

         

摘要

番木瓜环斑病毒(Papaya ringspot virus,PRSV)编码的核内涵体蛋白a蛋白酶(Nuclear inclusion body a proteinase,NIa-Pro)是一种多功能病毒非结构蛋白,在病毒侵染宿主及病毒与宿主互作中起着重要作用.本研究利用以麦芽糖结合蛋白(MBP)为融合表达框架的原核表达系统构建了表达NIa-Pro的重组载体pMAL-c5x-NP,并转化大肠杆菌,经IPTG诱导和Ni2+-NTA-琼脂糖亲和层析纯化获得了可溶的重组融合蛋白MBP-NIa(N端和C端分别融合MBP和His标签),然后利用蛋白酶Factor Xa切去重组融合蛋白中的MBP,再通过直链淀粉树脂亲和层析纯化获得了可溶的重组蛋白NIa-Pro.活性检测结果表明,重组蛋白PRSV-NIa-Pro具有非特异的双链DNA酶和特异的蛋白酶双重活性.

著录项

  • 来源
    《热带作物学报》 |2016年第4期|722-727|共6页
  • 作者单位

    海南大学农学院,海南海口 570228;

    中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口 571101;

    海南大学农学院,海南海口 570228;

    中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口 571101;

    中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口 571101;

    中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口 571101;

    中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口 571101;

    海南大学农学院,海南海口 570228;

    中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口 571101;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 Q939.46;
  • 关键词

    NIa-Pro; 番木瓜环斑病毒; 原核表达; 蛋白酶; DNA酶;

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