橡胶树HbJAZ3突变体蛋白的原核表达及纯化

何鑫; 吴绍华; 邓顺楠; 陈月异; 田维敏

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植物JAZ蛋白是茉莉酸信号调控途径的关键环节之一.HbJAZ3基因是橡胶树乳管细胞中编码JAZ蛋白的基因家族成员之一.本文采用原核表达和定点突变技术,构建了pET28a(+)-JAZ3、pET28a(+)-JAZ3-ZIM-mut(缺失ZIM结构域中TIFY基序)和pET28a(+)-JAZ3-Jas-mut(缺失Jas结构域的保守氨基酸FLEKRK)的His标签融合蛋白表达载体,并成功转化大肠杆菌Rosetta(DE3).在37℃条件下,用1 mmol/L IPTG诱导2h能够诱导目的蛋白以包涵体的形式大量表达.通过镍柱纯化了目的蛋白,获得了HbJAZ3及其ZIM结构域和Jas结构域的突变体蛋白,为进步一鉴定乳管细胞茉莉酸信号途径的关键环节打下了良好基础.

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来源
《热带作物学报》 |2013年第10期|1902-1906|共5页
作者
何鑫; 吴绍华; 邓顺楠; 陈月异; 田维敏;
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作者单位

海南大学园艺园林学院,海南海口 570228;

中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室海南儋州571737;

中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室海南儋州571737;

中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室海南儋州571737;

中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室海南儋州571737;

中国热带农业科学院橡胶研究所农业部橡胶树生物学与遗传资源利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地-海南省热带作物栽培生理学重点实验室海南儋州571737;

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正文语种 chi
中图分类橡胶树;
关键词
巴西橡胶树; HbJAZ3; 原核表达; 定点突变技术; 蛋白纯化;

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