新孢子虫SAG1-SRS2融合基因真核表达质粒的构建及表达

卢计委; 刘群; 汪明

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新孢子虫SAG1-SRS2融合基因真核表达质粒的构建及表达

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根据犬新孢子虫NcSAG1-NcSRS2融合基因序列,设计了1对含有Kozak序列、终止密码子、BamH Ⅰ和XhoⅠ酶切位点的引物,以含有NcSAG1-NcSRS2融合基因的质粒pGEX-tNcP43-P36为模板,经PCR 扩增获得NcSAG1-NcSRS2融合基因片段,用BamH Ⅰ和XhoⅠ双酶切该片段,回收得到含有以上2 个酶切位点黏端的NcSAG1-NcSRS2融合基因,将此基因片段克隆至相同酶切回收后的pcDNA3.1 (+) 真核表达载体中,获得重组质粒pcNCSAG1-SRS2.经PCR 鉴定、限制性内切酶酶切分析和克隆片段序列测定、比较,证实了重组质粒的正确性.将构建好的真核表达质粒转染到COS-7细胞中进行瞬时表达,经免疫荧光检测,证实了该载体能在细胞内进行蛋白表达.

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来源
《中国兽医杂志》 |2007年第12期|3-5|共3页
作者
卢计委; 刘群; 汪明;
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作者单位

中国农业大学动物医学院,北京,海淀,100094;

中国农业大学动物医学院,北京,海淀,100094;

中国农业大学动物医学院,北京,海淀,100094;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因的表达;
关键词
犬新孢子虫; NcSAG1-SRS2融合基因; 真核表达; 转染;

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