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人乳腺癌斑马鱼移植瘤模型建立

         
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Aim To investigate the modeling of breast cancer in zebrafish embryos and its related protein expression. Methods 48hpf wild type AB/ TG(Transgenic) zebrafishs were micro-in-jected with breast cancer cell line: MCF-7,T-47D, MDA-MB-231 respectively, the relationship between the number of tumor and model application was investigated, and the number of sub-intestinal veins(SIVs) was detected under confocal microscope, as well as the metastasis of tumor cells in embryos; then the ze-brafish xenografts of MB-231 were co-cultured with tofacitinib/ptk787 for 48 h, optical density(OD) of the cell survival and subintestinal veins(SIVs) were evaluated under confocal micro-scope, and Western blot(WB) analysis was used to test micro-circumstances related protein. Results When the number of in-oculated cells was more than 200 per embryo, xenograft model rate woule be more than 0. 90;MB-231 xenografts showed metas-tasis feature in zebrafish, which could be inhibited by tofacitinib (P < 0. 01), while the number of xenograft MB-231 cells was reduced significantly(P < 0. 01); in another zebrafish xenografts SIVs assay, the tumor could promote the proliferation of SIVs, and 4 mg·L - 1 PTK787 showed inhibiton effect( P < 0. 01). Western blot showed 4d T-47D xenograft zebrafish got more HER2 expression than AB embryos; VEGFa expression in ze-brafish MB-231 model group was higher, and model zebrafish P53 expressi was higher after treated by tofacitinib. Conclusion A zebrafish xenograft model of human brest cancer can be es-tablished, which demonstrates applicability for screening com-pounds in drug discovery studies.%目的：研究人乳腺癌斑马鱼移植瘤模型的建立方法及其相关的蛋白表达。方法分别选用 MCF-7、 T-47D、MDA-MB-231细胞系显微注射至斑马鱼幼鱼体内,考察不同乳腺癌细胞系在斑马鱼体内的定植迁移、细胞数量变化、细胞分布以及对斑马鱼肠下静脉丛(subintestinal veins, SIVs)的影响,建立乳腺癌斑马鱼移植瘤模型；并考察 JAK 抑制剂对斑马鱼移植肿瘤的影响,并对相关蛋白表达的情况进行蛋白印迹分析。结果在接种细胞数大于每只200时,斑马鱼的肿瘤模型成功率大于比例0．90；MB-231移植瘤在斑马鱼体内具有明显的迁移特征,这种特征可被 JAK 抑制剂 tofac-itinib 抑制(P <0．01)；同时 tofacitinib 可明显减少移植瘤模型体内 MB-231的数量(P <0．01)；移植瘤可促进 SIVs 增生,酪氨酸抑制剂 PTK787可明显地抑制移植瘤引起的 SIVs的生长(P <0．01)；蛋白印迹结果显示,4 d 斑马鱼胚胎自身HER2有表达,T-47D 斑马鱼模型组组织中 HER2表达增加；MB-231斑马鱼模型组组织中 VEGFa 高表达；tofacitinib 处理后的移植瘤其 p53表达增强。结论人源肿瘤通过微量显微注射方法可成功建立斑马鱼乳腺癌移植瘤模型,该模型可用于抗肿瘤药物的初步筛选研究。

著录项

  • 来源
    《中国药理学通报》 |2016年第1期|128-132|共5页
  • 作者

    陈锡强; 韩利文; 王希敏; 王荣春; 侯海荣; 刘可春; 彭维兵; 孙晨; 韩建;

  • 作者单位

    山东省科学院生物研究所;

    山东省科学院斑马鱼药物筛选平台;

    山东 济南 250014;

    山东省科学院生物研究所;

    山东省科学院斑马鱼药物筛选平台;

    山东 济南 250014;

    山东省科学院生物研究所;

    山东省科学院斑马鱼药物筛选平台;

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    山东省科学院生物研究所;

    山东省科学院斑马鱼药物筛选平台;

    山东 济南 250014;

    山东省科学院生物研究所;

    山东省科学院斑马鱼药物筛选平台;

    山东 济南 250014;

    山东省科学院生物研究所;

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    山东 济南 250014;

    山东省科学院生物研究所;

    山东省科学院斑马鱼药物筛选平台;

    山东 济南 250014;

    山东省科学院生物研究所;

    山东省科学院斑马鱼药物筛选平台;

    山东 济南 250014;

    山东省科学院生物研究所;

    山东省科学院斑马鱼药物筛选平台;

    山东 济南 250014;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 药物筛选和实验模型;泌尿生殖器肿瘤;移植与组织培养;
  • 关键词

    斑马鱼; 移植瘤模型; 乳腺癌; 血管生成; 抑制剂; to-facitinib;

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