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溴化乙锭对布鲁姆综合症解旋酶生物学特性的影响

         
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摘要

Aim To study the effects of ethidium bro-mide( EB ) on biological properties of BLM helicase. Methods Effects of EB on DNA-binding activity and helicase activity of BLM helicase were detected by fluorescence polarization; effect on ATPase activity was detected by free phosphorus assay technology; effect on conformation was detected by ultraviolet Absorption spectrum. Results DNA-binding activity of BLM helicase was completely inhibited by EB. Ci was respectively ( 21. 3 ± 0. 7 ) μmol · L-1 and ( 3. 3 ± 0. 3 ) μmol · L-1 when dsDNA and ssDNA reacted as thernsubstrates; helicase activity was also completely inhibited and Ci was ( 9. 0 ± 0. 3 ) μmol · L-1; ATPase activity was inhibited mildly and the disparity was not obvious ; conformation of the helicase was changed, and the maximum UV absorption had been shifted. Conclusion EB bound to BLM helicase may change the conformation, inhibit its binding to DNA, and further inhibit the biological activities of the helicase.%目的 研究溴化乙锭(EB)对BLM解旋酶的生物学特性的影响.方法 应用荧光偏振技术研究EB对BLM解旋酶的DNA结合活性与解链活性的影响;应用自由磷检测技术研究EB对BLM解旋酶的ATPase活性的影响;应用紫外吸收光谱法研究EB对BLM解旋酶的构象的影响.结果 EB可完全抑制BLM解旋酶的DNA结合活性,当双链DNA与单链DNA作为底物时,Ci值分别为(21.3±0.7) μmol·L-1和(3.3±0.3) μmol·L-1;可完全抑制BLM解旋酶的解链活性,Ci值为(9.0±0.3) μmol·L-1;对BLM解旋酶的ATPase活性有抑制作用,但差异无显著性;可改变BLM解旋酶的构象,最大吸收峰发生红移.结论 EB可以结合BLM解旋酶并改变其构象,抑制其与DNA的结合,从而抑制BLM解旋酶的生物学活性.

著录项

  • 来源
    《中国药理学通报》 |2012年第9期|1267-1272|共6页
  • 作者

    许庆贺; 许厚强; 骆衡; 陈祥; 张金彪; 李坤;

  • 作者单位

    贵州大学生命科学学院;

    高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室;

    贵州大学动物科学学院;

    高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室;

    贵州大学动物科学学院;

    高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室;

    贵州大学动物科学学院;

    贵州山地农业病虫害重点实验室;

    贵州大学农学院;

    贵州;

    贵阳;

    550025;

    高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室;

    贵州大学动物科学学院;

    贵州大学生命科学学院;

    高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室;

    贵州大学动物科学学院;

    贵州大学生命科学学院;

    高原山地动物遗传育种与繁殖省部共建教育部重点实验室;

    贵州大学动物科学学院;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 畸形学;酶制剂;
  • 关键词

    溴化乙锭; BLM解旋酶; DNA结合活性; 解链活性; ATPase活性; 构象;

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