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胃泌素对人结肠癌细胞Colo320WT中β-catenin/Tcf-4通路的影响

         

摘要

目的 探讨胃泌素对结肠癌细胞Colo320WT中β-catenin/Tcf-4通路影响.方法 10-8 mol·L-1胃泌素分别于0、1、6、12、24、48 h时间点干预Colo320WT细胞,同时先用10-6 mol·L-1胃泌素受体拮抗剂L365,260预干预Colo320WT细胞30 min,再加10-8 mol·L-1胃泌素干预至12 h.采用免疫共沉淀和免疫印迹检测Colo320WT中TX-100可溶性部分(胞质部分)和不可溶部分(细胞骨架结合部分)中β-catenin的表达及β-catenin/Tcf-4复合物的表达.免疫印迹观察c-Myc和cyclinD1的表达.结果 TX-100可溶性部分中β-catenin的量随着胃泌素干预时间呈递减趋势,12 h达最小;而TX-100不溶解部分却随时干预时间的呈递增趋势,12 h达最大.免疫共沉淀发现胃泌素干预后β-catenin/Tcf-4复合物表达量明显增多.免疫印迹检测到胃泌素干预下的细胞中c-Myc和cyclinD1表达明显增加.胃泌素受体拮抗剂阻断后,则可阻断胃泌素引起的上述效应.结论 胃泌素与其受体作用后使结肠癌细胞中β-catenin分布发生转移和活化β-catenin/Tcf-4通路来降低结肠癌细胞的黏附,增加肿瘤细胞的侵袭和转移.

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