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干扰hENT1表达增加5-FU在胰腺癌SW1990细胞内浓度

         

摘要

目的 明确hENT1在5-FU跨膜转运和返流中的作用,以及返流对5-FU在细胞内浓度的影响.方法 将能特异性下调hENT1的重组及对照质粒用脂质体法转染到SW1990细胞内,RT-PCR检测hENT1 mRNA表达情况.分别培养SW1990、pSilence-hENT1SiSW1990、pSilence-Control SW1990细胞,3组细胞均置于含5-FU 100 mg·L-1的DMEM中温浴.各组取等量细胞刮取液两份,一份用毛细管区带电泳测定5-FU含量、另一份作平行样本测定蛋白含量,最后计算细胞内5-FU浓度.结果 pSilence-hENT1SiSW1990细胞hENT1 mRNA表达水平下调0.5.SW1990组用5-FU温浴后,细胞内5-FU浓度在早期迅速升高,120 min后处于平台期.pSilence-hENT1Control-SW1990组与SW1990组相比无差异(P>0.05).而pSilence-hENT1SiSW1990细胞内5-FU浓度早期上升较慢,但随着时间延长,浓度逐渐升高,120 min后细胞内浓度稳定,高于对照组中浓度(P<0.05).结论 干扰hENT1表达可以提高5-FU在SW1990细胞内浓度.hENT-1是SW1990细胞向外返流5-FU的主要通道.

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