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转录共激活因子OBF-1调节p300表达的初步研究

         

摘要

OBF-1是淋巴细胞特异性转录共激活因子,其蛋白主要有2种异构体分别为p34和p35。为观察OBF-1对p300基因表达的影响,分离OBF-1-/-小鼠的脾脏单个核细胞及B细胞,采用RT-PCR及Western blot方法分别检测p300 mRNA和蛋白水平。构建小鼠OBF-1(p34)表达质粒和p300报告基因质粒。在293T细胞中过表达p34,检测p34对内源性p300蛋白表达的影响。将p34表达质粒和p300报告基因质粒共同转染293T细胞,通过荧光素酶报告基因方法检测p34对p300基因启动子转录活性的影响。结果:与来源于OBF-1+/+小鼠的脾脏单个核细胞相比,来源于OBF-1-/-小鼠的单个核细胞中p300表达无论是mRNA还是蛋白水平均明显降低。分析显示,OBF-1(p34)能够促进p300基因转录及蛋白表达。这些结果提示,OBF-1正调p300转录及表达。

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