辐射诱导肺上皮细胞GATA3表达及其RNA甲基化修饰机制

衣峻萱; 董晓丹; 薛文翔; 高姝颖; 薛乃雯; 金顺子

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辐射诱导肺上皮细胞GATA3表达及其RNA甲基化修饰机制

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目的探讨肺上皮细胞的辐射反应中GATA3的表达和m^(6)A修饰的调控机制,为放射性肺损伤的发生机制与临床防治提供新的治疗靶点。方法首先,分别给予人肺上皮细胞系(A549)和小鼠肺上皮细胞系(MLE-12)单次10 Gy(剂量率为1 Gy/min)和6 Gy(剂量率为0.75 Gy/min)X射线辐照;采用慢病毒感染法在A549细胞转染shRNAVIRMA质粒和在MLE-12中转染siRNA-VIRMA干扰片段抑制VIRMA基因(RNA甲基化酶)的表达;利用比色法定量检测m^(6)A RNA甲基化水平;采用qRT-PCR法检测受照的A549和MLE-12细胞中VIRMA、GATA3和EMT标志物的mRNA的表达变化,利用Western Blots法检测受照的A549和MLE-12细胞中VIRMA、GATA3和EMT标志物蛋白的表达变化。结果结果显示,辐射诱导A549和MLE-12细胞中甲基化酶VIRMA上调,进而增强总RNA的m^(6)A水平,同时上调GATA3基因和蛋白水平表达,进而诱导上皮—间质转化(EMT)过程的发生。进一步在A549和MLE-12细胞内,干扰VIRMA基因时,明显降低GATA3基因和蛋白的表达水平,显著抑制EMT相关分子的表达。结论辐射诱导肺上皮细胞发生m^(6)A修饰,通过正向调控GATA3基因表达,诱导EMT的发生,进而对放射性肺损伤进程起到重要作用。

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来源
《中国辐射卫生》 |2023年第3期|223-229|共7页
作者
衣峻萱; 董晓丹; 薛文翔; 高姝颖; 薛乃雯; 金顺子;
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作者单位

吉林大学公共卫生学院;

国家卫健委放射生物学重点实验室;

吉林长春130021;

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正文语种 chi
中图分类辐射生物学（放射生物学）;
关键词
m6A修饰; 放射性肺损伤; VIRMA; EMT; GATA3;

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