荧光PCR探针熔解分析法检测质粒介导ampC耐药基因的应用与评价

郑港森; 刘赞赞; 张加勤; 宋秀宇; 李庆阁; 黄朝阳; 马晓波; 房丽丽

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目的探讨多重荧光PCR-探针熔解分析法应用于临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ampC耐药基因的检测方法,并评价该方法的临床应用价值。方法收集医院2009年7月-2010年6月的临床分离菌株,首先采用头孢西丁纸片法进行耐药表型筛选,再同时应用传统PCR技术与荧光PCR-探针熔解曲线法对临床分离菌株进行检测,并对ampC耐药基因扩增产物进行DNA测序。结果经头孢西丁纸片法筛选出176株对头孢西丁不敏感临床分离菌株,其中97株为肺炎克雷伯菌、79株为大肠埃希菌;在176株临床分离株中,荧光PCR-探针熔解分析法检测出36株ampC耐药基因阳性菌株,包括18株DHA型、12株CIT型和5株EBC型,还有1株肺炎克雷伯菌同时含有DHA型和EBC型;而传统PCR技术检出32株ampC耐药基因阳性,两个检测结果的符合率为97.7%;DNA测序后经BLAST比对,荧光PCR-探针熔解分析法检测ampC基因型与所检测目的基因型一致。结论荧光PCR-探针熔解分析法能高效检测出质粒介导ampC耐药基因,其方法简便、敏感性高、特异性强,具有良好的临床应用价值。

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来源
《中华医院感染学杂志》 |2016年第2期|241-244|共4页
作者
郑港森; 刘赞赞; 张加勤; 宋秀宇; 李庆阁; 黄朝阳; 马晓波; 房丽丽;
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作者单位

厦门大学附属第一医院检验科;

福建厦门361003;

厦门大学生命科学院生物医学科学系;

福建厦门361005;

厦门市中心血站;

福建厦门361004;

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正文语种 chi
中图分类实验室诊断;
关键词
质粒; AmpC酶; 聚合酶链反应; 肺炎克雷伯菌; 大肠埃希菌;

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