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两种提取孕妇血浆游离胎儿DNA方法的比较

         

摘要

目的分别应用两种方法进行血浆游离胎儿DNA的提取,判定及筛选最佳的血浆游离胎儿DNA的提取方法,为后续试验提取游离胎儿DNA的方法提供参考依据。方法收集30例健康妊娠孕妇血浆,用离心柱法和磁珠法进行血浆游离DNA的提取,经甲基化敏感限制性内切酶Bst UI酶切后使用微量紫外分光光度计测量所提取的游离胎儿DNA的含量及纯度,再使用实时荧光定量PCR扩增方法测定扩增效率,进行统计学分析。结果离心柱法所提取的游离胎儿DNA的测定结果为:含量(43. 27±21. 01) ng/μl;纯度A260/A280 (0. 999 7±0. 084 42);扩增效率为94%;而磁珠法提取的游离胎儿DNA的测定结果为:含量(31. 74±12. 25) ng/μl:纯度A260/A280 (0. 878 3±0. 052 66);扩增效率为87%。两组方法提取游离DNA的浓度、纯度比较,差异有统计学意义(均P<0. 05)。结论离心柱法比磁珠法操作更简便、快捷。经测定提取的DNA的浓度及纯度,扩增效率后可判断离心柱法所提取的游离胎儿DNA的浓度、纯度及扩增效率都远远优于磁珠法;离心柱法比磁珠法更适用于后续无创产前诊断研究试验。

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