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番茄LemiR828的克隆表达及其靶基因的鉴定

         

摘要

以番茄(Lycopersicum esculentum)LA1996(Aft基因型,紫色花青素积累品系)c DNA为模板,对Lemi R828前体基因和预测到的靶基因Le TAS4(Trans-Acting Si RNA Gene 4)进行克隆,采用RT-PCR技术检测其在番茄果实发育中的差异表达,并用RLM 5′RACE技术验证Lemi R828对预测靶基因Le TAS4m RNA的剪切作用及靶作用位点。结果表明,Lemi R828的前体序列含有完整的茎环结构;在果实发育成熟的过程中,Lemi R828及Le TAS4在番茄中的表达量存在差异。在绿色果阶段的表达量较低且Lemi R828对Le TAS4的负调控关系不明显;而在成熟果阶段,Lemi R828及Le TAS4的表达量均升高,且存在明显的负调控关系。Lemi R828能够靶作用于Le TAS4的转录本上调控其降解,其剪切位点为Lemi R828序列5′端的第10位碱基。因此,在LA1996番茄果实发育过程中,Lemi R828和Le TAS4参与果实发育的调控,并且Lemi R828负调控其靶基因Le TAS4的表达。

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