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理气活血滴丸对动脉粥样硬化模型ApoE^(-/-)小鼠主动脉Integrin-YAP/TAZ通路的影响

         
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目的 探讨理气活血滴丸治疗动脉粥样硬化的可能作用机制。方法 50只载脂蛋白基因E敲除(ApoE-/-)小鼠给予高脂饲料喂养制备动脉粥样硬化模型,将45只造模成功小鼠随机分为模型组、阿托伐他汀组及理气活血滴丸低、中、高剂量组,每组9只;9只C57BL/6J小鼠设为正常组。理气活血滴丸低、中、高剂量组分别给予理气活血滴丸75、150、300 mg/(kg·d)灌胃,阿托伐他汀组给予阿托伐他汀钙片2 mg/(kg·d)灌胃,正常组与模型组每日给予0.3 ml的蒸馏水灌胃。4周后采用油红O染色和HE染色观察各组小鼠主动脉弓根部病理变化,计算管腔内斑块面积占比,采用Western blot法测定主动脉中整合素αVβ3(IntegrinαVβ3)、Yes相关蛋白(YAP)、含PDZ结合序列的转录活化共因子(TAZ)、磷酸化Yes相关蛋白(p-YAP)、血管生成诱导剂61 (CYR61)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组小鼠主动脉壁可见明显动脉粥样硬化斑块,可见大量的脂质、柳叶状胆固醇结晶,动脉粥样硬化斑块面积占比及主动脉中IntegrinαVβ3、YAP、TAZ、CYR61、CTGF蛋白表达增多,p-YAP蛋白表达减少(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,理气活血滴丸各剂量组和阿托伐他汀组小鼠动脉粥样硬化斑块厚度降低,斑块内柳叶状胆固醇结晶和脂肪空泡减少,动脉粥样硬化斑块面积占比不同程度降低,YAP、TAZ蛋白表达减少,p-YAP蛋白表达增多,理气活血滴丸中剂量组、阿托伐他汀组IntegrinαVβ3蛋白表达减少,理气活血滴丸中、高剂量组及阿托伐他汀组CYR61、CTGF蛋白表达减少(P<0.05或P<0.01);与阿托伐他汀组比较,理气活血滴丸各剂量组的斑块面积占比均升高,斑块内脂肪空泡和胆固醇结晶均增多,理气活血滴丸低、高剂量组p-YAP蛋白表达减少,理气活血滴丸低、中剂量组CYR61、CTGF蛋白表达增多,理气活血滴丸低剂量组IntegrinαVβ3蛋白表达增多(P<0.05或P<0.01);与理气活血滴丸高剂量组比较,理气活血滴丸中剂量组斑块内脂肪空泡和胆固醇结晶均减少,结构相对致密,理气活血滴丸低、中剂量组CYR61、CTGF蛋白表达增多(P<0.05或P<0.01);与理气活血滴丸中剂量组比较,理气活血滴丸低剂量组斑块内脂肪空泡和胆固醇结晶均增多,IntegrinαVβ3蛋白表达增多,p-YAP蛋白表达减少(P<0.05或P<0.01)。结论 理气活血滴丸具有抗动脉粥样硬化的作用,其作用机制可能与调控主动脉Integrin-YAP/TAZ通路有关,以高剂量调控效果最佳。

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