基于重组蛋白SP41的布鲁氏菌间接ELISA检测方法的建立及初步应用

张辉; 陈创夫; 乔军; 王远志; 曹旭东; 任艳

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基于重组蛋白SP41的布鲁氏菌间接ELISA检测方法的建立及初步应用

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对布鲁氏菌黏附素SP41蛋白进行表达、纯化,以表达重组蛋白为包被抗原,建立了检测布鲁氏菌病绵羊血清抗体的间接ELISA方法。克隆布鲁氏菌SP41基因,PRC、酶切、测序鉴定正确后,构建pET-32a(+)-SP41原核表达载体,转化表达菌E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达重组SP41蛋白,纯化表达产物后包被酶标反应板,方阵滴定法进行最佳血清稀释度和最侍抗原浓度的筛选,结果显示重组蛋白SP41最佳抗原包被浓度为0.6mg/L,最佳血清稀释度为1:50。交叉试验、阻断试验、重复性试验表明,该方法重复性好、特异性强。利用此方法检测217份绵羊血清样本,结果表明该方法的阳性检出率要高于虎红平板试验和试管凝集试验。

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来源
《中国兽医学报》 |2010年第5期|624-628|共5页
作者
张辉; 陈创夫; 乔军; 王远志; 曹旭东; 任艳;
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作者单位

新疆地方与民族发病教育部重点实验室;

新疆石河子832003;

石河子大学动物科技学院;

新疆石河子832003;

石河子大学医学院;

新疆石河子832003;

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正文语种 chi
中图分类病原细菌;
关键词
布鲁氏菌; SP41基因; 间接ELISA;

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