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丁酸盐对骨髓来源树突状细胞中STING信号通路的影响

         
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为探究丁酸盐（butyrate, BU）对环鸟苷酸-腺苷酸（cyclic GMP-AMP,cGAMP）激活的骨髓来源树突状细胞（bonemarrow-derived dendritic cell, BMDC）中干扰素基因刺激因子（stimulator of interferon gene, STING）信号通路的调控效应，体外诱导、培养制备BMDC后，将细胞分为对照组、BU组、cGAMP组和BU+cGAMP组及聚脱氧腺苷-脱氧胸苷[Poly （deoxyadenylic-deoxythymidylic）,Poly（dA:dT）]/lip2000组、BU+Poly（dA:dT）/lip2000组。光学显微镜下观察各组BMDC形态；FACS检测BMDC表面标志CD80、CD86和MHCⅡ类分子的表达情况，并检测BU及cGAMP处理后BMDC对特异性CD4+T细胞活化、增殖及分化能力的影响；Griess偶联反应及qPCR分别检测BMDC合成一氧化氮（nitric oxide, NO）和表达诱生型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase, iNOS）的能力；ELISA检测对照组、BU组、cGAMP组、BU+cGAMP组、Poly（dA:dT）/lip2000组及BU+Poly（dA:dT）/lip2000组细胞培养上清液中IFN-β、IL-6和IL-12的含量；qPCR检测BMDC中IFN-β、IL-6和IL-12的mRNA相对表达量；Western blotting检测STING信号通路相关蛋白的表达，如STING、TANK结合激酶1（TANK binding kinase 1,TBK1）和p-TBK1等。结果显示，BU可显著上调BMDC表面CD80、CD86和MHCⅡ类分子的表达，但BU抑制STING激动剂cGAMP引起的BMDC表面CD80、CD86和MHCⅡ类分子的表达，抑制NO及IFN-β、IL-6的合成和分泌（均P＜0.05）;BU显著抑制cGAMP促进CD4+T细胞的增殖，对初始CD4+T细胞向Th1分化无明显影响；STING激动剂Poly（dA:dT）引起BMDC IFN-β、IL-6和IL-12分泌的增加也可被BU抑制（均P＜0.05）。由此，BU可在BMDC中抑制因STING信号通路激活上调的CD80、CD86和MHCⅡ类分子及NO、IFN-β、IL-6的合成和分泌，并抑制其对CD4+T细胞增殖的促进作用。

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