抗癌胚抗原单链抗体基因与Mn-SOD基因的融合及在昆虫细胞中的表达

杨卫东; 李彪; 朱承谟; 吴祥甫

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抗癌胚抗原单链抗体基因与Mn-SOD基因的融合及在昆虫细胞中的表达

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将抗癌胚抗原单链抗体基因与锰超氧化物歧化酶基因融合（ScFv Mn SOD ）插入昆虫杆状病毒供体质粒pFastBacHTb中 ,经大肠杆菌DH1 0Bac体内转座 ,产生重组杆状病毒pBacHTb Mn SOD ScFv。将其转染粉纹夜蛾Tn 5B1 4细胞 ,经扩增后在细胞内进行表达。SDS PAGE分析结果表明 ,融合基因得到高效表达 ,其表达产物相对分子质量为 40 0 0 0单体和 1 60 0 0 0左右的四聚体。Western印迹分析结果 ,以 6×His单克隆抗体为一抗进行蛋白印迹在相对分子质量 40 0 0 0单体和 1 60 0 0 0四聚体处可见表达条带 ,放射免疫分析表明重组杆状病毒表达ScFv Mn SOD融合蛋白能与CEA有较高的结合力 ,并且此融合蛋白具有特异SOD酶活性 ,酶比活可达 32 6 5u/mg。

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来源
《现代免疫学》 |2002年第5期|293-296|共4页
作者
杨卫东; 李彪; 朱承谟; 吴祥甫;
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作者单位

上海第二医科大学附属瑞金医院核医学科;

上海第二医科大学附属瑞金医院核医学科;

上海第二医科大学附属瑞金医院核医学科;

中国科学院上海生化研究所上海200025;

上海200025;

上海200025;

上海200031;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类肿瘤免疫学与血清学;
关键词
癌胚抗原; 单链抗体; 锰超氧化物歧化酶; 昆虫杆状病毒表达;

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