重组人蛋白激酶CK 2α亚基的原核表达、纯化与鉴定

刘新光; 梁念慈; 马涧泉

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将构建成功的人蛋白激酶 CK2 α亚基 c DNA的重组质粒 ,转化大肠杆菌 BL2 1 ( DE3) ,IPTG诱导后获特异高效表达 ,表达蛋白占菌体总蛋白的 30 % ,但大多数重组蛋白以不溶形式存在 .表达产物依次进行 DE- 5 2、P1 1磷酸纤维素和肝素 - Sepharose柱层析分离 ,最后从 30 9mg可溶性蛋白质中得到 6.1 mg纯化蛋白 . SDS- PAGE显示纯化的蛋白质为一分子量 4 2 k D的单一蛋白带 .Western- blot的结果证明 :纯化的表达产物与抗人 CK2α抗体可发生特异性免疫反应 . CK2α和β亚基等摩尔分子混合可组成有完全活性的全酶 .重组的 CK2全酶的性质和功能与该酶的已知特性一致 .这些结果证明重组蛋白是人蛋白激酶 CK2

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |2000年第1期|17-22|共6页
作者
刘新光; 梁念慈; 马涧泉;
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作者单位

广东医学院医用生化研究所;

中山医科大学生化教研室;

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正文语种 chi
中图分类医学遗传工程;
关键词
人蛋白激酶CK2α亚基; 原核表达; 纯化; 鉴定;

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