人黑素瘤单链抗体-量子点纳米探针的制备及其与黑素瘤细胞特异性结合

张小敏; 张堂德; 鲍晨晨; 宋华; 李娜; 刘彬; 贺蓉; 李智铭; 崔大祥; 任秋实

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目的:制备抗人黑素瘤细胞单链抗体与碲化镉量子点(CdTe guantun dot,CdTe)连接的纳米探针,观察其对恶性黑素瘤细胞的特异性结合效果。方法:将抗人黑素瘤神经节苷脂单链抗体(anti-human melanoma ganglioside single chain varia-ble fragment antibody,GD/ScFvMEL)基因克隆到pET32a(+)载体中,然后在BL21(DE3)细菌中进行诱导表达,采用变性法纯化表达的蛋白,再用改良的透析法复性目的蛋白,SDS-PAGE分析表达的GD/ScFvMEL抗体蛋白。制备的GD/ScFvMEL抗体与量子点连接制备成纳米探针GD/ScFvMEL-QDs,然后与黑素瘤A375细胞株及胃癌MGC-803细胞株孵育,观察纳米探针与肿瘤细胞结合的特异性。结果:PCR、双酶切和序列测定证实重组子的拼接完全正确,SDS-PADE结果显示,GD/ScFvMEL抗体的表达量达40%。纯化复性后的GD/ScFvMEL抗体连接量子点制备GD/ScFvMEL-QDs纳米探针,经扫描电镜、X衍射分析、荧光光谱和SDS-PAGE分析证实纳米探针的成功制备。GD/ScFvMEL-QDs纳米探针能特异性结合A375黑素瘤细胞,不与胃癌细胞MGC-803细胞结合。结论:成功制备抗人黑素瘤神经节苷脂单链抗体-量子点纳米探针,该探针可特异性结合黑素瘤细胞。

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来源
《中国肿瘤生物治疗杂志》 |2010年第1期|30-35|共6页
作者
张小敏; 张堂德; 鲍晨晨; 宋华; 李娜; 刘彬; 贺蓉; 李智铭; 崔大祥; 任秋实;
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作者单位

南方医科大学珠江医院皮肤科;

上海交通大学微纳科学研究院生物纳米工程研究室;

上海交通大学生命科学技术学院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类皮肤肿瘤;肿瘤免疫学与血清学;
关键词
黑素瘤; 神经节苷脂; 单链抗体; 量子点; 纳米探针;

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