肠上皮细胞损伤模型中细胞自噬对Caco-2细胞紧密连接蛋白表达的影响

温伟伟; 郑红梅; 姜英健; 李洪波; 张佃良

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肠上皮细胞损伤模型中细胞自噬对Caco-2细胞紧密连接蛋白表达的影响

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目的探讨脂多糖(LPS)诱导肠上皮细胞损伤模型中,肠上皮细胞自噬对肠上皮Caco-2细胞紧密连接(TJ)蛋白表达的影响。方法在人肠癌细胞系Caco-2细胞中建立LPS诱导肠上皮细胞损伤模型,细胞分为空白对照组(A组)、单独的LPS处理组(B组)、LPS+自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)组(C组)。以电阻仪分别检测3组Caco-2细胞跨上皮电阻(TER)值;通过检测荧光素异硫氰酸酯-葡聚糖(FITC-dextran)透过率,分别观察3组细胞的细胞间通透性;以Western blot方法检测3组细胞自噬标志蛋白微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、肠上皮细胞TJ蛋白Zonula occluden-1(ZO-1)、claudins-2(CL-2)、occludin(OC)的表达水平;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测肠上皮细胞CL-2、ZO-1和OC mRNA表达。结果 C组在各时点TER值较A、B组明显降低(F=83.82~271.83,P<0.05);C组细胞间FITC-D4的透过率高于A、B组(F=724.92,P<0.05);C组的LC3Ⅱ蛋白表达低于A、B组(F=134.72,P<0.05);C组与B组相比CL-2蛋白表达增加,ZO-1和OC蛋白表达降低,差异均有统计学意义(F=90.03~329.08,P<0.05);RT-PCR检测结果显示,C组CL-2 mRNA较B组表达增加,而ZO-1和OC mRNA表达降低,差异均有统计学意义(F=339.81~580.32,P<0.05)。结论在LPS诱导肠上皮细胞损伤模型中,肠上皮细胞自噬可能降低肠上皮细胞CL-2表达,提高ZO-1和OC表达,以此维持肠上皮细胞TJ作用,从而保护肠上皮屏障。

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来源
《康复与疗养杂志》 |2017年第2期|185-188|共4页
作者
温伟伟; 郑红梅; 姜英健; 李洪波; 张佃良;
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作者单位

青岛大学医学院附属青岛市市立医院结直肠中心;

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正文语种 chi
中图分类消化与吸收;
关键词
肠黏膜; 自噬; 紧密连接蛋白质类; Caco-2细胞;

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