抗人肿瘤坏死因子-α单链抗体与其配体的相互作用

陈萍; 邓健蓓; 韩骅; 药立波; 苏成芝

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抗人肿瘤坏死因子-α单链抗体与其配体的相互作用

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为了在大肠杆菌中表达纯化抗人 TNF- α单链抗体并检测其结合活性与中和活性 .利用GST融合蛋白系统在大肠杆菌中表达抗人 TNF- α单链抗体 E6Sc Fv;分离包含体后进行变性和复性 ,再用亲和层析法进行纯化 ;用 ELISA法和酵母双杂交系统检测 E6Sc Fv与配体的结合 ;用 L92 9细胞检测 E6Sc Fv对人 TNF- α细胞毒作用的中和活性 .经变性 ,复性与亲和层析 ,E6Sc Fv被纯化 ,在 SDS- PAGE上为单一蛋白带 ;体外结合与中和实验表明 ,表达纯化的 E6Sc Fv可与人 TNF-α结合并中和其细胞毒活性 ;进一步用酵母双杂交系统证明当表达于细胞内时 ,E6Sc Fv仍保持了与TNF-α相结合的能力 .

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |2000年第4期|430-433|共4页
作者
陈萍; 邓健蓓; 韩骅; 药立波; 苏成芝;
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作者单位

第四军医大学生物化学与分子生物学教研室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类免疫生物学;细胞融合工程;
关键词
人TNF-α; 单链抗体; 酵母双杂交; E6ScFV; 胞内抗体;

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