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A549细胞中过表达p16INK4A引起细胞衰老样表型的研究

         

摘要

目的研究p16INK4A对A549肺小细胞腺癌细胞系表型的影响.方法用pcDNA3-p16质粒转染p16基因缺失的A549肺小细胞腺癌细胞系并通过Northern blot和Western blot鉴定p16基因的异位表达,通过流式细胞仪分析转染后细胞周期变化,利用Western blot和SA-β-gal染色检测Rb蛋白磷酸化状态的改变和细胞表型变化.结果证实了在A549中p16INK4A能稳定表达.p16INK4A的表达能使细胞产生明显的G1期阻滞并伴随着Rb蛋白磷酸化状态的改变,Rb蛋白主要以低磷酸化形式存在.发生生长阻滞的转染细胞表现出一系列细胞衰老样表型,如细胞体积变大,细胞形态呈明显的扁平状态,并且存在衰老相关半乳糖苷酶阳性染色.结论在A549细胞中表达p16INK4A能使细胞发生衰老样表型并提示p16INK4A在细胞衰老中起重要作用.

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