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曲马多下调miR-574-5p对胃癌细胞增殖及凋亡的影响机制研究

         

摘要

目的 探讨曲马多(Tramadol)对胃癌细胞增殖与凋亡能力的影响及其分子机制.方法 采用MTT法检测曲马多对胃癌细胞增殖能力的影响;采用流式细胞术检测曲马多对胃癌细胞凋亡率的影响;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-574-5p表达水平;观察抑制miR-574-5p表达或miR-574-5p过表达后胃癌细胞增殖及凋亡行为的变化情况;蛋白免疫吸附法(Western blot)检测细胞中Bax、Bcl2蛋白表达水平.结果 不同浓度的曲马多处理后,胃癌细胞增殖能力显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高(P<0.05),并可显著上调Bax的表达(P<0.05),而明显下调Bcl2的表达(P<0.05);通过MTT实验筛选出曲马多的作用浓度为300μg/ml,以300μg/ml的曲马多处理胃癌细胞后miR-574-5p的表达水平显著降低(P<0.05);抑制miR-574-5p表达后可减弱胃癌细胞增殖能力,促进细胞凋亡,而miR-574-5p过表达后可逆转曲马多对胃癌细胞增殖及凋亡的作用.结论 曲马多通过下调miR-574-5p的表达抑制胃癌细胞增殖及促进细胞凋亡,其作用机制可能与上调Bax蛋白表达及下调Bcl2蛋白表达有关.

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