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首页> 中文期刊> 《国际病理科学与临床杂志》 >ERCC1siRNA对鼻咽癌细胞HNE-1/DDP顺铂耐药的影响及机制

ERCC1siRNA对鼻咽癌细胞HNE-1/DDP顺铂耐药的影响及机制

         
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目的:研究切除修复交叉互补基因1(excision repair cross complement 1,ERCC1) siRNA对鼻咽癌细胞HNE-1/顺铂(cisplatin,DDP)耐药的影响及机制.方法:以qRT-PCR和Western印迹法测定人鼻咽癌细胞HNE-1/DDP和HNE-1细胞中ERCC1表达水平.人鼻咽癌细胞HNE-1/DDP转染ERCC1siRNA重组慢病毒载体和阴性对照载体,以qRT-PCR和Western印迹法测定干扰效果.用DDP处理转染ERCC1 siRNA的HNE-1/DDP细胞,MTT检测细胞增殖变化,克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞凋亡变化,Western印迹法检测细胞中激活型caspase-3(C-caspase-3)、激活型caspase-9(C-caspase-9)蛋白水平,同时用Western印迹法检测细胞质和线粒体中细胞色素C(cytochrome C)蛋白水平.结果:HNE-1/DDP细胞中ERCC1表达水平高于HNE-1细胞.ERCC1 siRNA可明显下调HNE-1/DDP细胞中ERCC1的表达和转录.DDP和ERCC1 siRNA可以降低HNE-1/DDP细胞增殖能力和克隆形成能力,提高细胞凋亡率,促进细胞中C-caspase-3,C-caspase-9蛋白表达,提高细胞质中cytochrome C蛋白水平,降低线粒体中cytochrome C蛋白水平.DDP处理转染ERCC1 siRNA的HNE-1/DDP细胞,细胞的增殖和克隆能力下降更多,细胞凋亡率升高更多,细胞中C-caspase-3,C-caspase-9蛋白水平更高,细胞质中cytochrome C蛋白水平也更高,线粒体中cytochrome C蛋白水平下降更多.结论:ERCC1 siRNA能够逆转鼻咽癌细胞HNE-1/DDP对DDP耐药,作用机制可能与激活线粒体凋亡途径有关.

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