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肿瘤抑制蛋白基因Tp53在牦牛体外受精早期胚胎中的表达

     
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本研究旨在探讨肿瘤抑制蛋白基因(tumor protein p53,Tp53)在牦牛(Bos grunneins)早期不同发育时期体外受精胚胎中的表达情况及其与体外受精胚胎发育的关系.本实验采集牦牛卵巢,收集牦牛卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes,COCs)进行体外成熟培养及对成熟卵母细胞体外受精后进行培养.采用RT-PCR、实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)和间接免疫荧光方法检测不同时期体外受精胚胎发育过程中Tp53在基因和蛋白水平的表达动态.结果表明,在不同发育时期体外受精胚胎中均有Tp53基因的表达,并且Tp53在2～4细胞期和囊胚期表达量相对较低,组间差异不显著(P＞0.05);Tp53在5～8细胞期和9～16期表达量相对较高,组间差异不显著(P＞0.05);在2～4细胞期和囊胚期表达量与在4～8细胞期和9～l6期表达量相比差异显著(P＜0.05).本研究表明,Tp53在调节牦牛早期胚胎发育中也起着非常重要的作用.Tp53的表达量与胚胎发育阻断的发生几率成正相关.间接免疫荧光显示Tp53蛋白主要存在于细胞核中,少量存在于细胞质中,其作用和DNA的损伤有关.

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