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c-Myc转基因小鼠构建的改良方法

         

摘要

以CMV-PAAV载体为基础载体,以皮肤特异人K14(人角蛋白14)基因启动子替换原质粒中的CMV启动子后,在其多克隆位点区插入鼠c-Myc基因的cDNA序列和GFP编码序列,构建成高效表达c-Myc基因的真核表达载体.通过双原核显微注射技术,将线性化的载体DNA注入到C57BL6近交系小鼠(Mus musculus)受精卵的2个原核中,将注射后状态良好的胚胎移植到代孕鼠的输卵管中,共移植了200枚受精卵,6只受体怀孕,最终获得44只成年小鼠.通过PCR和Southern blot分析证明,2只为阳性转基因小鼠,转基因阳性率为4%.Southern blot结果分析显示,外源片段是以多拷贝串联重复的形式整合到鼠染色体中.

著录项

  • 来源
    《农业生物技术学报》 |2008年第1期|37-40|共4页
  • 作者单位

    华中农业大学动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室,武汉,430070;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所基因与细胞工程研究室,北京,100094;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所基因与细胞工程研究室,北京,100094;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所基因与细胞工程研究室,北京,100094;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所基因与细胞工程研究室,北京,100094;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所基因与细胞工程研究室,北京,100094;

    中国农业科学院北京畜牧兽医研究所基因与细胞工程研究室,北京,100094;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 农业生物工程;
  • 关键词

    人角蛋白K14; 转基因小鼠; c-Myc基因; 皮肤特异表达;

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