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Lactobacillus reuteri PYR8亚油酸异构酶基因在大肠杆菌中的表达与活性检测

         

摘要

以Lactobacillus reuteri PYR8菌株基因组为模板,利用PCR方法扩增出亚油酸异构酶(1inoleate isomerase,LI)基因,亚克隆到pET30a中构建原核表达载体pET30a-LI,并转化入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中.其重组菌株在37℃条件下,经1.0mmol/LIPTG诱导表达重组LI蛋白,该蛋白以包涵体形式存在,表达量占菌体总蛋白的39.2%.采用Ni2+-NTA柱上复性法获得有活性的纯化重组亚油酸异构酶,其比活力5.12 U/mg,是天然亚油酸异构酶比活力的2.5倍.

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