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拟南芥转录因子基因WRKY72的特性分析及其抗逆功能鉴定

         

摘要

拟南芥(Arabidopsis thaliana)WRKY72转录因子属于Ⅱb亚组成员.为探明WRKY72基因的特性及其在非生物胁迫中的作用,本研究采用多种细胞分子生物学方法进行研究.亚细胞定位发现WRKY72转录因子定位在细胞核中.qRT-PCR检测WRKY72对多种逆境与激素处理的响应,结果表明在热害、盐害、脱落酸、低氮、葡萄糖等非生物胁迫处理3h后,WRKY72的转录水平显著受到抑制.酵母体内转录活性分析以及双荧光素酶报告系统分析显示WRKY72是一个转录抑制子.酵母双杂交(yeast two-hybrid,Y2H)和双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)发现,WRKY72不仅能与近源的WRKY9、WRKY36、WRKY47、WRKY61、WRKY72转录因子发生互作,还能与自身发生互作.利用该基因T-DNA插入突变体进行表型分析,结果显示,wrky72突变体在百草枯(methyl viologen,MV)和低氮(low nitrogen,LN)处理下主根延伸长度显著变短,说明WRKY72对MV和LN敏感,提示WRKY72参与调控活性氧耐受和氮营养吸收或利用过程.综上所述,WRKY72可能与自身及一些近源WRKY转录因子互作,以多聚体的形式发挥其转录抑制子的功能,并参与特定的非生物胁迫相关的信号转导过程.本研究为深入解析WRKY72转录因子的抗逆功能与分子调控机制提供了资料基础.

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