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脂质体介导外源基因体外转染牦牛乳腺上皮细胞条件的优化

         
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[目的]优化脂质体介导外源基因体外转染牦牛乳腺上皮细胞的条件.[方法]通过胶原酶消化法和组织块贴壁法,体外分离培养得到牦牛乳腺上皮细胞.采用免疫细胞化学技术检测细胞角蛋白在细胞内的表达.以绿色荧光蛋白为报告基因,通过脂质体介导外源基因转染牦牛乳腺上皮细胞,统计在不同细胞融合度、脂质体浓度、脂质体与质粒的比例、转染时间下的转染效率,寻求最佳转染条件.[结果]牦牛乳腺上皮细胞在细胞融合度为81%～90%,脂质体的量为1.8 μl,脂质体与质粒比例为2∶1,转染时间为4 h时,转染效率最高.[结论]该研究可为乳腺生物反应器构建提供试验依据.

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