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转抗草甘膦基因烟草T-DNA侧翼序列的扩增与分析

         

摘要

[目的]研究抗草甘膦基因在烟草中的插入位点、T-DNA结构等整合情况.[方法]利用现有的3个转抗草甘膦基因的烟草材料,通过PCR Walking的方法扩增出携带抗草甘膦基因的T-DNA侧翼序列,并用DNAMAN、BLAST等生物信息学方法进行分析.[结果]对获得的PCR条带进行分析,结果表明这些侧翼序列均含载体骨架序列且结构各不相同,T-DNA和载体骨架序列都存在重组现象.[结论]研究在转基因植株中检测到了载体的骨架结构,说明转基因的同时有可能会造成非目的基因的转移,即转基因植物存在一定的风险,应对转基因植物转化载体和基因工程技术路线进一步改良.%[Objective]The aim of the research was to study the integrated site and T-DNA structure of the transgene insertion events in transgenic glyphosate-resistant tobacco. [Method]Using PCR Walking, the flanking fragments of T-DNAs in 3 transgenic glyphosate-resistant tobacco plants were amplified and sequenced, and the sequences with DNAMAN software and BLAST software online were analyzed. [Result]Sequence analysis of the fragments amplified showed that both of them contained vector backbone sequences. These vector backbones appeared in different types. The recombination occurred in T-DNA and vector backbone sequences. [Conclusion]The vector backbone sequences were detected in 3 transgenic glyphosate-resistant tobacco plants. The study showed that had some risk in transgene plant. It is necessary to improve plant transformation vector and genetic engineering technical line.

著录项

  • 来源
    《安徽农业科学》 |2009年第21期|9899-99019906|共4页
  • 作者单位

    中国农业科学院棉花研究所;

    农业部棉花遗传改良重点实验室;

    河南安阳;

    455000;

    中国农业科学院棉花研究所;

    农业部棉花遗传改良重点实验室;

    河南安阳;

    455000;

    中国农业科学院棉花研究所;

    农业部棉花遗传改良重点实验室;

    河南安阳;

    455000;

    中国农业科学院棉花研究所;

    农业部棉花遗传改良重点实验室;

    河南安阳;

    455000;

    中国农业科学院棉花研究所;

    农业部棉花遗传改良重点实验室;

    河南安阳;

    455000;

    中国农业科学院棉花研究所;

    农业部棉花遗传改良重点实验室;

    河南安阳;

    455000;

    中国农业科学院棉花研究所;

    农业部棉花遗传改良重点实验室;

    河南安阳;

    455000;

    中国农业科学院棉花研究所;

    农业部棉花遗传改良重点实验室;

    河南安阳;

    455000;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 农业生物工程;
  • 关键词

    转基因烟草; T-DNA; 整合; 侧翼序列;

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