pEGFP-N1-hTERT真核表达载体的构建与表达鉴定

李勇; 李军; 吕长荣; 窦忠英

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pEGFP-N1-hTERT真核表达载体的构建与表达鉴定

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[目的]构建pEGFP-N1-hTERT真核表达载体,观察其在真核细胞中的表达.[方法]利用pC1-neo-hTERT和pEGFP-N1质粒构建重组质粒,通过双酶切鉴定、DNA测序分析验证人端粒酶逆转录酶基因(hTERT)片段的准确性.将pEGFP-N1-hTERT真核表达载体转染到大鼠胎儿神经干细胞(NSCs)中,通过绿色荧光蛋白间接观察人端粒酶逆转录酶蛋白在细胞中的表达定位,通过RT-PCR、Western-Blot验证所构建的真核表达质粒pEGFP-N1-hTERT的正确性.[结果]所构建的pEGFP-N1-hTERT真核表达载体结构正确并能够在真核细胞中表达.[结论]该研究为建立大鼠永生化NSCs系奠定了基础.

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来源
《安徽农业科学》 |2008年第35期|15370-1537215478|共4页
作者
李勇; 李军; 吕长荣; 窦忠英;
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作者单位

宁夏大学西部特色生物资源保护与利用教育部重点实验室;

宁夏银川75002;

西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心;

陕西杨凌;

712100;

宁夏职业技术学院;

宁夏银川750002;

西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心;

陕西杨凌;

712100;

西北农林科技大学国家干细胞工程技术研究中心陕西分中心;

陕西杨凌;

712100;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类农业生物工程;
关键词
GFP; hTERT; 真核表达载体; 构建; 鉴定;

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