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冷暖型小麦基因差异的最佳RAPD反应体系研究

         

摘要

为了建立小麦RAPD反应的最佳体系,保证反应结果的稳定性和可靠性,寻找小麦冷暖型基因差异,降低试验成本,在相同PCR扩增程序(94 ℃预变性5 min,94 ℃变性45 s,38 ℃退火1 min,72 ℃延伸1.5 min,40个循环,72 ℃延伸10 min,4 ℃保存)下,对冷暖型小麦基因组DNA的RAPD扩增体系各参数进行比较筛选, 创建其最佳反应体系为:25 μl反应体系中,模板DNA 20 ng,10×PCR 缓冲液2.5 μl,dNTPs 0.2 mmol/L,Taq酶1 U,Mg2+浓度为2.0 mmol/L,ddH2O 12 μl,随机引物10 ng.

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