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猪白细胞介素12 p35、p40亚基基因的克隆和序列分析

         

摘要

目的:克隆猪白细胞介素(IL)-12 p35、p40亚基基因,为制备猪囊尾蚴的复合基因疫苗奠定基础.方法:分别分离成年猪的外周血单个核细胞和脾细胞,培养10 h后用IFN-γ(100 ng/ml)刺激增殖12 h,随后加入细菌脂多糖 (1 μg/ml)刺激培养3 h,分别收集细胞并提取细胞总RNA,用RT-PCR方法扩增猪IL-12 p35、p40 cDNA 编码基因,克隆至pMD18-T载体,经PCR和双酶切鉴定后进行序列测定.结果:猪IL-12 p35、p40 cDNA PCR 产物电泳结果证明所克隆的基因分别为616 bp和1 011 bp,基因测序结果与GenBank 报道的基因序列各有一个碱基差异,但编码氨基酸无差异,证实分别为猪IL -12 p35、p40 cDNA 编码基因.结论:成功克隆了猪IL-12 p35、p40 cDNA 编码基因.

著录项

  • 来源
    《蚌埠医学院学报》 |2008年第6期|644-647|共4页
  • 作者单位

    蚌埠医学院免疫学教研室,安徽,蚌埠,233030;

    安徽省感染与免疫重点实验室,蚌埠医学院,安徽,蚌埠,233030;

    安徽省感染与免疫重点实验室,蚌埠医学院,安徽,蚌埠,233030;

    蚌埠医学院病原生物学教研室,安徽,蚌埠,233030;

    安徽省感染与免疫重点实验室,蚌埠医学院,安徽,蚌埠,233030;

    蚌埠医学院病原生物学教研室,安徽,蚌埠,233030;

    安徽省感染与免疫重点实验室,蚌埠医学院,安徽,蚌埠,233030;

    蚌埠医学院病原生物学教研室,安徽,蚌埠,233030;

    蚌埠医学院免疫学教研室,安徽,蚌埠,233030;

    安徽省感染与免疫重点实验室,蚌埠医学院,安徽,蚌埠,233030;

    安徽省感染与免疫重点实验室,蚌埠医学院,安徽,蚌埠,233030;

    蚌埠医学院病原生物学教研室,安徽,蚌埠,233030;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 囊虫病;免疫细胞生物学;
  • 关键词

    囊尾蚴病; 白细胞介素12; p35; p40; RT-PCR; 基因克隆; 序列测定;

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