人核心蛋白聚糖的克隆及其在大肠杆菌中的表达

王利民; 温铭杰; 李慎涛

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人核心蛋白聚糖的克隆及其在大肠杆菌中的表达

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目的在大肠杆菌中高效表达人核心蛋白聚糖,并建立适当的纯化方法,制备重组蛋白.方法根据GenBank中人核心蛋白聚糖的序列设计特异性引物,从人肝cDNA文库中PCR扩增核心蛋白聚糖的编码序列,克隆到原核表达载体pET42a中,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,获得以高效表达的目的重组蛋白;用SDS-PAGE和质谱鉴定重组蛋白.结果重组蛋白主要以包涵体形式表达,SDS-PAGE显示其分子质量与预期结果相符;经质谱鉴定,表达的重组蛋白为人核心蛋白聚糖.结论成功地在大肠杆菌中高效表达了人核心蛋白聚糖,并纯化得到人核心蛋白聚糖蛋白,经鉴定,纯化所得到的蛋白为人核心蛋白聚糖.

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来源
《滨州医学院学报》 |2009年第3期|192-194197|共4页
作者
王利民; 温铭杰; 李慎涛;
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作者单位

烟台市莱阳中心医院,265200;

首都医科大学基础医学院免疫学系;

首都医科大学基础医学院免疫学系;

首都医科大学基础医学院免疫学系;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;
关键词
核心蛋白聚糖; 原核表达; 蛋白纯化; 质谱鉴定;

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