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Cpf1核酸酶的原核表达、纯化及多克隆抗体制备与鉴定

         

摘要

将Cpf1核酸酶N端166个氨基酸的DNA编码序列克隆至pET-28a(+)质粒中,在大肠杆菌BL21中进行重组表达,对诱导其表达的IPTG浓度和诱导时间开展条件优化.利用6×His纯化标签得到的重组蛋白作为抗原进行动物免疫,间接ELISA方法测定免疫后抗血清效价达到128000,并经Protein A纯化后得到抗体,Western Blot分析抗体的特异性,结果显示可以特异性识别大肠杆菌中表达的Cpf1(1-166)和Cpf1,为Cpf1在生物体中的检测提供工具,且将为推动CRISPR/Cpf1系统在生物体中的应用奠定良好的实验基础.

著录项

  • 来源
    《生物学杂志》 |2020年第6期|23-27|共5页
  • 作者单位

    滨州学院 生物与环境工程学院 山东省黄河三角洲野生植物资源开发利用工程技术研究中心 滨州256603;

    滨州学院 生物与环境工程学院 山东省黄河三角洲野生植物资源开发利用工程技术研究中心 滨州256603;

    滨州学院 生物与环境工程学院 山东省黄河三角洲野生植物资源开发利用工程技术研究中心 滨州256603;

    滨州学院 生物与环境工程学院 山东省黄河三角洲野生植物资源开发利用工程技术研究中心 滨州256603;

    滨州学院 生物与环境工程学院 山东省黄河三角洲野生植物资源开发利用工程技术研究中心 滨州256603;

    滨州学院 生物与环境工程学院 山东省黄河三角洲野生植物资源开发利用工程技术研究中心 滨州256603;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因工程(遗传工程);
  • 关键词

    CRISPR-Cpf1; 大肠杆菌; 原核表达; 蛋白纯化; 多克隆抗体;

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