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硫酸铜诱导烟草多酚氧化酶抗变性的研究

         

摘要

为了进一步探讨外源铜与多酚氧化酶的相互作用,通过酶活性测定,荧光光谱和圆二色光谱 (CD)对外源Cu2+诱导烟草多酚氧化酶抗变性进行了研究.荧光光谱结果表明,没有外源铜存在的情况下,盐酸胍诱导的烟草多酚氧化酶变性是一个二态过程,烟草多酚氧化酶在6 mol/L盐酸胍中变性5 min,酶活性降至18.6%,变性30 min便彻底失活; 10.0 mmol/L外源铜存在时,盐酸胍诱导的烟草多酚氧化酶变性是一个三态过程,上述相同盐酸胍浓度下变性相同时间,酶的剩余活性分别为60.6%和24.9%.CD谱数据结果表明, 6 mol/L盐酸胍中变性30 min,烟草PPO二级结构中α-螺旋、反平行β-折叠、β-转角/平行β-折叠、芳香残基和二硫键、无规卷曲/γ-转角的百分含量分别为1.1、 3.8、 3.3、 7.5和84.3;在10.0 mmol/L Cu2+存在时,上述相同变性条件下,各种二级结构百分含量分别为34.2、 13.7、 21.0、 9.5和21.6.适量外源铜可明显提高烟草多酚氧化酶结构的稳定性.

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