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缺氧缺血致脑室周围白质软化新生大鼠连接蛋白47表达及其对少突胶质细胞髓鞘化的影响

         

摘要

目的探讨连接蛋白(Cx)47在缺氧缺血(HI)致新生大鼠脑室周围白质软化(PVL)发生、发展中表达,阐明Cx47对少突胶质细胞(OLs)髓鞘化的影响。方法将120只出生3 d的新生大鼠随机分为HI组和对照组,每组各60只。采用右侧颈总动脉结扎后低氧2 h建立PVL动物模型,在手术后l、3、7、14 d分别留取脑组织标本,采用HE染色、透射电镜观察脑组织形态学改变,免疫组化、Western blotting和实时PCR方法检测2组Cx47蛋白和基因表达。结果光镜下可见对照组脑组织结构致密,神经胶质细胞形态完整,排列均匀,胞核大,染色清晰。HI组手术后1 d细胞间隙增宽,细胞肿胀、变形、细胞核固缩;手术后3 d可见侧脑室旁白质细胞大量坏死,神经纤维走行紊乱,脑组织结构疏松模糊呈囊性及筛网状坏死;手术后7 d脑室旁白质坏死区域更为广泛,呈簇状及点状坏死,水肿减轻,出现不同程度胶质增生;手术后14 d脑白质胼胝体变薄,纤维走向紊乱,呈网状或条索状,部分出现囊腔病变侧脑室扩大。透射电镜下对照组呈现完整的细胞形态,细胞间缝隙连接紧密;HI组可见OLs出现溶解碎裂,细胞之间缝隙连接开放。免疫组化可见Cx47与髓鞘碱性蛋白(MBP)表达定位于OLs,与对照组比较,HI组Cx47与MBP表达均减少(P<0.01)。2组Cx47蛋白及基因表达水平随大鼠日龄增加而增加;与对照组比较,HI组各时间Cx47表达均较降低(P<0.01)。结论在HI致PVL新生大鼠模型中存在OLs损伤、髓鞘化障碍、缝隙连接开放,在此过程中Cx47表达显著降低,提示Cx47可能参与髓鞘化障碍及缝隙连接开放。

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