人碱性成纤维生长因子重组质粒的构建

樊力红; 陈学清; 陈科全; 杨晓强; 张振书

首页> 中文期刊> 《中国医师杂志》 >人碱性成纤维生长因子重组质粒的构建

人碱性成纤维生长因子重组质粒的构建

开具论文收录证明 >>

文献代查 >>

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

目的通过基因体外拼装（PBGA）获得带有BanmHI和PstⅠ内切酶位点的重组人碱性成纤维生长因子（rhbFGF）cDNA,并利用TA克隆技术构建含rhbFGF基因片段的重组质粒。方法（1）根据已知的hbFGF氨基酸序列并结合乳酸链球菌蛋白表达密码子来设计适于乳链菌内表达的hhFGF基因序列,分别在5′和3′端设计BamHl和pstⅠ酶切位点,通过DNASTAR 6.0将上述目的基因序列设计成22个可以相互重叠的寡核苷酸片段,bFGF1-bFGF22。（2）采用基因拼装技术,通过PCR反应,拼接1～22段寡核苷酸片段,合成带有设定内切酶位点的rhbFGF cDNA。（3）构建rhbFGF TA克隆载体。纯化上步拼接rhbFGF基因片段,产物与PMDl8-T VECFOR进行连接反应。。连接产物转化于E.coli TOpl0感受态细胞,涂板、筛选、培养后提质粒,酶切鉴定并测序。结果（1）体外拼装带有BamHI和PstⅠ内切酶酶切位点的rhhFGFeDNA经2%琼脂糖电泳验证;（2）构建了载体hrbFGF-PMD18,经酶切鉴定和测序证实碱基序列完全正确。结论利用PBGA和TA克隆技术可成功构建rhbFGF-PMD18重组质粒。

著录项

来源
《中国医师杂志》 |2012年第5期||共页
作者
樊力红; 陈学清; 陈科全; 杨晓强; 张振书;
展开▼
作者单位

1. 南方医科大学附属广州南方医院消化疾病研究所 2. 广州医学院第一附属医院消化内科 3. 广州陆军总医院消化内科;

展开▼
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 R346;
关键词
重组蛋白质类/遗传学; 成纤维细胞生长因子2/遗传学; 质粒; 遗传载体;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 乳酸菌重组人碱性成纤维生长因子表达载体的构建及鉴定 [J] . 蒋永洪 ,陈科全 ,陈学清 . 现代消化及介入诊疗 . 2016,第002期
2. pEGFP-prohibitin真核表达重组质粒的构建及其在人肝癌细胞系HepG2中的表达 [J] . 翟嵩 ,孙明珠 ,王文俊 . 肝脏 . 2016,第001期
3. 人类Munc18-1重组质粒的构建及蛋白表达和定位 [J] . 吴怡 ,王婧 ,王岚 . 中国神经免疫学和神经病学杂志 . 2015,第006期
4. 重组质粒pRNAT-U6.1/CFB siRNA的构建、鉴定及其对人脐静脉内皮细胞增生的影响 [J] . 仝欢1 ,尚庆丽1 ,马景学1 . 中华实验眼科杂志 . 2015,第008期
5. 重组质粒pRNAT-U6.1/CFB siRNA的构建、鉴定及其对人脐静脉内皮细胞增生的影响 [J] . 仝欢 ,尚庆丽 ,马景学 . 中华实验眼科杂志 . 2015,第008期
6. 人表面活性物质蛋白-B基因启动子荧光素酶报告基因重组质粒的构建及活性检测 [C] . 王席娟 ,蔡保欢 ,李文斌 . 中国医师协会第三次全国新生儿科医师大会 . 2013
7. 一.TNFR1死亡和/或非死亡结构域与tmTNF-α杀伤靶细胞的关系探讨二.选择性亲和TNFR1/TNFR2的tmTNF-α突变体重组质粒的构建和TNFR1突变体重组质粒的构建 [A] . 胡雪娜 . 2012

人碱性成纤维生长因子重组质粒的构建

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅