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炎症刺激对人脐带间充质干细胞生物学功能的影响及作用机制研究

         

摘要

目的探讨炎症刺激对人脐带间充质干细胞生物学功能的影响及作用机制。方法无菌条件下取正常足月剖腹产脐带血40~60 ml,以Ficoll-Hypaque液梯度离心分离细胞,常规培养24 h后分为C组、LPSL组、LPSM组、LPSH组,C组加入完全培养液,LPSL组、LPSM组、LPSH组分别加入含有12. 5、25、50μg/ml脂多糖(LPS)的等量培养液,观察不同浓度LPS孵育对脐带间充质干细胞Toll样受体4(TLR4)、核因子-κB(NF-κB)蛋白表达间充质干细胞增殖和成骨分化的影响。结果孵育24 h和48 h,LPSL、LPSM、LPSH组间充质干细胞增殖活性均高于C组(P <0. 05),且低剂量LPS诱导间充质干细胞的增殖能力最强(P <0. 05),48 h增殖活性高于24 h(P <0. 05)。随着培养时间增加,四组NF-κB、TLR4蛋白表达逐渐增加,LPSL、LPSM、LPSH组均高于C组(P <0. 05),且随着LPS浓度升高,NF-κB、TLR4蛋白表达逐渐升高,差异均有统计学意义(P <0. 05)。LPSL、LPSM、LPSH组碱性磷酸酶(ALP)活力和钙结节数量均高于C组,LPSM组ALP活力和钙结节数量高于LPSH组,LPSL组ALP活力和钙结节数量高于LPSM组和LPSH组,差异均有统计学意义(P <0. 05)。结论炎性反应可刺激人脐带间质干细胞增殖和成骨分化,低浓度的LPS可能是脐带间充质干细胞成骨分化的理想因子,在实际的临床疾病治疗中具有一定的意义和应用前景。

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