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人牙周膜体外分离培养及其成骨表型的研究

         

摘要

目的:体外培养人牙周膜细胞(human periodontal ligament fibroblasts hPDLFs),并对其成骨表型特征进行研究。方法:采用胶原酶消化法获得大量成活率高的人牙周膜细胞。在DMEM培养基中进行原代及传代培养,免疫组化方法检测细胞波形丝蛋白及角蛋白的表达,鉴定细胞。使用矿化液诱导,然后应用碱性磷酸酶活性检测、Von Kossa染色等方法观察hPDLFs在矿化液作用下生物学特性的改变。结果:hPDLFs呈星形或长梭形,免疫组化波形丝蛋白阳性,角蛋白阴性,证实该细胞来源可靠。矿化诱导5d后,有部分hPDLFS转化为成骨样细胞,碱性磷酸酶活性显著升高,诱导20 d后可见矿化结节形成。结论:酶消化法可以快速得到大量hPDLFs,且hPDLFs具有一定的成骨表型特征。

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