中国明对虾溶菌酶点突变基因的原核表达

谭广毅; 丛丽娜; 姜启晨; 卢冬

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中国明对虾溶菌酶点突变基因的原核表达

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为解决中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)溶菌酶成熟肽(FcLys)可溶性问题,构建了点突变基因的原核表达质粒,并进行重组表达.以已构建的带有FcLys目的基因的重组克隆质粒为模板扩增FcLys点突变(FcLysM)的基因片段,将该对虾溶菌酶成熟肽序列的N端和C端中含有几个疏水性氨基酸经点突变改为亲水性氨基酸,但不改变其活性中心和二硫键的形成.将FcLysM的基因片段与表达载体连接并转化,制得基因工程菌pET-39b(+)-FcLysM/Rosetta (DE3).通过基因测序方法验证该重组表达质粒读码框的准确性以及FcLysM目的基因序列的正确性.该工程菌表达后在SDS-PAGE结果显示,表达产物为分子质量约为43 ku的融合蛋白FcLysM.进一步研究分析证明,该重组点突变蛋白的可溶性表达量高于非突变的对虾溶菌酶表达量.

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来源
《大连工业大学学报》 |2014年第2期|90-93|共4页
作者
谭广毅; 丛丽娜; 姜启晨; 卢冬;
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作者单位

大连工业大学生物工程学院,辽宁大连 116034;

大连工业大学生物工程学院,辽宁大连 116034;

大连工业大学生物工程学院,辽宁大连 116034;

大连工业大学生物工程学院,辽宁大连 116034;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基础科学;基因的表达;
关键词
中国明对虾溶菌酶; 融合蛋白FcLysM; 点突变基因; 原核表达;

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