利用CRISPR/Cas9技术对鸡AMHR2基因进行精确编辑

黄思嘉; 祝梦琦; 李鹏程; 张智英; 魏泽辉

首页> 中文期刊> 《家畜生态学报》 >利用CRISPR/Cas9技术对鸡AMHR2基因进行精确编辑

利用CRISPR/Cas9技术对鸡AMHR2基因进行精确编辑

开具论文收录证明 >>

期刊封面封底目录下载 >>

文献代查 >>

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

为了在鸡基因组上对AMHR2基因进行精确编辑,该研究利用crispr,mit.edu:807网站设计并通过PCR退火拟合获得成对的AMHR2基因靶位点,将靶位点分别整合进pX330-U6-Chimeric_ dBsa I-CBh-hSpCas9载体骨架,构建靶向AMHR2基因的成对CRISPR/Cas9敲除载体.将包含成对靶位点的DNA序列整合进pB-CMV-DsRed-CAG-Chimerie.200 bp repeat.Puro-T2A-GFP载体骨架,构建与敲除载体对应的双荧光报告载体.载体测序鉴定正确后分别共转染HEK293T细胞与鸡DF-1细胞,通过细胞荧光粗略判断CRISPR/Cas9系统是否工作.随后,利用Puromycin对基因编辑阳性的DF-1细胞进行药物筛选富集,提取细胞基因组进行TA克隆,进一步检测CRISPR/Cas9系统的工作效率.结果表明靶向鸡AMHR2基因的CRISPR/Cas9敲除系统构建成功,且成对靶位点敲除系统的工作效率高于单一靶位点敲除系统,CRISPR/Cas9敲除系统在DF-1细胞基因组上对AMHR2基因的敲除效率约为60.0％,并在鸡DF-1细胞基因组上实现了AMHR2基因的精确编辑.

著录项

来源
《家畜生态学报》 |2020年第6期|12-18|共7页
作者
黄思嘉; 祝梦琦; 李鹏程; 张智英; 魏泽辉;
展开▼
作者单位

西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100;

西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100;

西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100;

西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100;

西北农林科技大学动物科技学院陕西杨凌712100;

展开▼
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类家畜生态学;
关键词
CRISPR/Cas9; 基因敲除; AMHR2; 鸡;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 利用CRISPR/Cas9技术对人多能干细胞进行高效基因组编辑 [J] . 刘改改 ,李爽 ,韦余达 . 遗传 . 2015,第011期
2. 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建CDH1基因敲除的人乳腺癌MCF-7稳定细胞系 [J] . 高伟健 ,朱一超 ,郑幽 . 生物技术通讯 . 2020,第002期
3. 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除团头鲂socs1重复基因 [J] . 赵心愉 ,刘娟 ,邹曙明 . 水产学报 . 2020,第012期
4. 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术建立FcγR基因大片段敲除小鼠模型 [J] . 吴曦 ,霍桂桃 ,刘甦苏 . 中国实验动物学报 . 2019,第005期
5. 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术靶向敲除奶山羊胎儿成纤维细胞SCD1基因 [J] . 刘雷雷 ,贾启鹏 ,李宗帅 . 甘肃农业大学学报 . 2019,第006期
6. 利用CRISPR/Cas9编辑广东小耳花猪IGF2基因 [C] . 刘小凤 ,王敏 ,刘小红 . 第25届广东省科技进步活动月——畜牧兽医学术与科技创新发展大会 . 2016
7. 利用CRISPR/Cas9系统构建基因编辑猴及CRISPR/Cas9系统应用优化 [A] . 崔益强 . 2017

利用CRISPR/Cas9技术对鸡AMHR2基因进行精确编辑

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅