芽孢杆菌35家族β-半乳糖苷酶的性质及其在合成低聚半乳糖中的应用

王建宇; 李婷; 李敬; 江正强; 闫巧娟

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低聚半乳糖是一种重要的益生元,芽孢杆菌(Bacillales sp.)来源的β-半乳糖苷酶具有转半乳糖苷活性,能合成低聚半乳糖。研究了一个新的芽孢杆菌来源的β-半乳糖苷酶的表达、酶学性质及其在合成低聚半乳糖中的应用。从芽孢杆菌中克隆了一个糖苷水解酶35家族的β-半乳糖苷酶基因(BABgal35A),并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。多重序列比对结果表明:BABgal35A与环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)来源的β-半乳糖苷酶同源性最高,为79.9%,是一个新型的β-半乳糖苷酶(命名为BABgal35A)。粗酶液经Ni-IDA亲和层析纯化得到电泳级纯酶,蛋白电泳分析表明其分子质量为60 kDa左右,最适pH值和温度分别为5.0和55℃,并且该酶在pH值为4.5~8.0,温度为20~45℃时稳定性好。BABgal35A对o NP-β-galactopyranoside具有较高的催化活性。该酶以乳糖为底物合成低聚半乳糖的产率达34%。研究结果表明,芽孢杆菌35家族β-半乳糖苷酶在低聚半乳糖的制备中具有潜在的应用价值。

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来源
《食品科学技术学报》 |2023年第6期|29-38|共10页
作者
王建宇; 李婷; 李敬; 江正强; 闫巧娟;
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作者单位

中国农业大学工学院/中国轻工业食品生物工程重点实验室;

中国农业大学食品科学与营养工程学院;

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正文语种 chi
中图分类其他;
关键词
芽孢杆菌; Β-半乳糖苷酶; 功能性低聚糖; 酶学性质; 低聚半乳糖;

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