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罗氏沼虾雌激素相关受体(ERR)基因原核表达与纯化

         
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摘要

根据已知罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)雌激素相关受体基因序列(GenBank登录号KU899089),设计含有酶切位点的特异性引物,PCR扩增得1374 bp的开放阅读框序列,构建原核表达载体pET-32a-ERR,并优化诱导浓度、诱导时间、诱导温度等表达条件.结果表明,ERR蛋白在温度35℃、IPTG浓度0.1 mmol/L条件下,诱导4 h时表达量较佳.%Estrogen-related receptor (ERR)belongs to the orphan nuclear receptor family, which mainly participates in the estrogen signaling pathway, and plays key role in the regulation of metabolism and development. According to the ERR sequences of Macrobrachium rosenbergii(GenBank accession number: KU899089), thespecific primers containing restriction sites was designed and synthesized.The open reading frame (ORF) of ERR was amplified by PCR, and wasconstructedinto the pET-32a vector forthe prokaryotic expression. Concentration of IPTG,time of induction and temperaturewere optimized for ERR protein expression. Results showed that the ERR protein could be successfullyand efficiently expressed under the condition of0.1 mmol/L IPTG, and 35℃ for 4 hours in Escherichia coli.

著录项

  • 来源
    《广东海洋大学学报》 |2017年第1期|108-112|共5页
  • 作者

    赵苗鑫; 陈华谱; 刘金磊; 邓思平; 李广丽; 朱春华; 洪宇聪;

  • 作者单位

    海洋生态与养殖环境湛江市重点实验室,广东海洋大学水产学院,广东 湛江 524088;

    海洋生态与养殖环境湛江市重点实验室,广东海洋大学水产学院,广东 湛江 524088;

    海洋生态与养殖环境湛江市重点实验室,广东海洋大学水产学院,广东 湛江 524088;

    海洋生态与养殖环境湛江市重点实验室,广东海洋大学水产学院,广东 湛江 524088;

    海洋生态与养殖环境湛江市重点实验室,广东海洋大学水产学院,广东 湛江 524088;

    海洋生态与养殖环境湛江市重点实验室,广东海洋大学水产学院,广东 湛江 524088;

    广东臻媛水产实业发展有限公司,广东 揭阳 522010;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因的表达;
  • 关键词

    罗氏沼虾; 雌激素相关受体基因; 原核表达;

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