结核分枝杆菌甲硫氨酰tRNA合成酶的结晶方法

王炜; 蒋雪松; 张岱; 吕莹

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结核分枝杆菌甲硫氨酰tRNA合成酶的结晶方法

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目的制备结核分枝杆菌甲硫氨酰tRNA合成酶(Mt MetRS)晶体。方法设计不同的重组Mt MetRS蛋白,使用大肠杆菌表达重组蛋白。坐滴气相扩散法在293 K温度下筛选不同重组蛋白的结晶条件,并使用悬滴法进行晶体优化。优化的晶体经液氮速冻保存。在上海同步辐射光源进行晶体衍射数据采集。结果使用不同设计的重组蛋白进行结晶筛选和优化,最终获得了可以进行晶体衍射的高分辨率蛋白质晶体。并确定6×His序列在Mt MetRS分子的结晶中起到关键作用。结论 Mt MetRS分子两端的6×His序列是帮助Mt MetRS分子结晶的重要因素。

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来源
《广东药科大学学报》 |2022年第3期|114-119|共6页
作者
王炜; 蒋雪松; 张岱; 吕莹;
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作者单位

河南中医药大学第一附属医院检验科;

中国医学科学院病原生物学研究所;

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正文语种 chi
中图分类 R378.911;
关键词
结核分枝杆菌; 甲硫氨酰tRNA合成酶; 晶体;

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