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首页> 中文期刊> 《广西医科大学学报》 >miR-22-3p在妊娠期糖尿病患者胎盘外泌体中的表达及其对血管内皮细胞功能的影响

miR-22-3p在妊娠期糖尿病患者胎盘外泌体中的表达及其对血管内皮细胞功能的影响

         
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目的:探讨miR-22-3p在妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘外泌体中的表达及其对血管内皮细胞增殖、小管形成能力的影响和相关机制.方法:收集GDM患者与正常妊娠孕产妇的外周静脉血及胎盘组织,并从外周血中分离、鉴定胎盘外泌体.体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),采用脂质体转染技术对细胞中miR-22-3p进行过表达或敲低;采用高糖处理转染后的HUVEC,并将其分为阴性对照组(NC),高糖组(HG),高糖+miR-22-3pmimic组(HG+miR-22-3p mimic组);高糖+miR-22-3p inhibitor组(HG+miR-22-3p inhibitor组),HG+miR-NC组.CCK-8及小管形成实验分别检测上述各组HUVEC的增殖活性及成管能力;生物信息学分析并应用双荧光素酶基因报告实验检测miRNA-22-3p与神经导向因子Netrin-1的靶向调控关系;免疫组织化学染色检测Netrin-1在胎盘组织中的表达及定位;Speaman分析胎盘外泌体中miR-22-3p含量与胎盘组织中Netrin-1蛋白表达的相关性.结果:成功分离了胎盘外泌体;与正常妊娠组相比,miR-22-3p在GDM组胎盘外泌体中的表达增加;与NC组相比,HG组,HG+miR-22-3p mimic组、HG+miR-22-3p inhibitor和HG+miR-NC组细胞增殖活力及成管形成能力增加.而与HG组相比,miR-22-3p mimic组HUVEC的上述功能明显增加,但miR-22-3p inhibitor组却显著降低.双荧光素酶基因报告实验表明miR-22-3p能够靶向调控Netrin-1表达,且Netrin-1在GDM组胎盘组织中表达较正常妊娠组降低,Spearman分析发现在GDM组中胎盘外泌体miR-22-3p含量与Netrin-1表达水平呈负相关.结论:GDM胎盘外泌体中异常高表达的miR-22-3p可能通过抑制Netrin-1蛋白表达,上调内皮细胞的增殖及成管形成能力,从而促进GDM的发生发展.

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