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首页> 中文期刊> 《吉林大学学报（医学版）》 >妊娠期糖尿病患者胎盘组织中miRNA-508-3p和HGF表达水平及其对滋养细胞胰岛素抵抗的影响

妊娠期糖尿病患者胎盘组织中miRNA-508-3p和HGF表达水平及其对滋养细胞胰岛素抵抗的影响

         
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目的:探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者胎盘组织中微小RNA-508-3p(miR-508-3p)与肝细胞生长因子(HGF)的表达及两者的相互作用,初步阐明miR-508-3p介导滋养细胞胰岛素抵抗(IR)的相关分子机制.方法:选取GDM患者及正常妊娠孕产妇各15例,分别为GDM组和正常对照组.采用实时定量PCR(RT-PCR)法、免疫组织化学染色法和免疫印迹法检测2组孕产妇胎盘组织中miR-508-3p表达水平和HGF蛋白表达水平,分析两者的相关性.应用生物信息学技术筛选HGF作为miR-508-3p的目标靶基因,并通过双荧光素酶报告基因实验及免疫印迹法进行验证.体外培养人滋养细胞HTR-8/Svneo,建立HTR-8/Svneo IR细胞模型(HTR-8/Svneo-IR),采用脂质体瞬时转染法对HTR-8/Svneo-IR细胞转染miR-508-3p-inhibitor(miR-508-3p-inhibitor-IR组)和miR-NC(miR-NC-IR组),RT-PCR法检测其转染效率,免疫印迹法检测各组细胞中HGF及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路中磷酸化PI3K(p-PI3K)和磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达水平.结果:与正常对照组比较,GDM组患者胎盘组织中miR-508-3p表达水平明显升高(P<0.05),HGF蛋白表达水平明显降低(P<0.01),且GDM组患者胎盘组织中HGF蛋白表达水平与miR-508-3p表达水平呈负相关关系(r=-0.542,P<0.05).与HTR-8/Svneo组比较,HTR-8/Svneo-IR组细胞中miR-508-3p表达水平明显升高(P<0.05);与HTR-8/Svneo-IR组比较,miR-508-3p-inhibitor-IR组细胞中miR-508-3p表达水平明显降低(P<0.05).与HTR-8/Svneo组比较,HTR-8/Svneo-IR组细胞中HGF、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);与HTR-8/Svneo-IR组比较,miR-508-3p-inhibitor-IR组细胞中HGF、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平明显升高(P<0.05).结论:在GDM患者胎盘组织中miR-508-3p可靶向抑制HGF的表达,并通过PI3K/AKT信号通路促进滋养细胞的IR,继而参与GDM的发生发展.

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