滋养细胞

摘要： 目的 观察miR-30a-3p在复发性流产患者绒毛组织中的表达,及其对滋养细胞(HTR-8)凋亡、迁移功能的影响。方法 采用qRT-PCR检测复发性流产患者(RSA组)及正常早孕妊娠(正常组)要求终止的患者各20例绒毛组织中miR-30a-3p的表达水平。在HTR-8细胞中转染miR-30a-3p前体分子,共分3组:miR-30a-3p模拟物组(mimic组)、miR-30a-3p抑制物组(inhibitor组)和阴性对照组(NC组)。流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell试验检测细胞侵袭能力。结果 qRT-PCR结果显示,与正常组相比,RSA组绒毛组织中miR-30a-3p表达量显著降低(P<0.05)。与NC组相比,mimic组HTR-8细胞中miR-30a-3p表达升高,inhibitor组miR-30a-3p表达水平降低(P<0.05)。流式细胞结果显示,与NC组相比,inhibitor组细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。Transwell结果显示,与NC组相比,inhibitor组迁移能力显著降低(P<0.05)。结论 复发性流产绒毛组织中低表达的miR-30a-3p可能导致滋养细胞凋亡增加,迁移力降低,从而导致复发性流产的发生。

摘要： 自噬普遍存在于真核细胞的自我降解过程中,受多种分子机制调控,已成为近年细胞死亡途径的研究热点之一。自噬的生理功能包括提供能量、维持细胞内环境稳定和促进异常细胞凋亡。近年来,复发性流产(RSA)因发病率逐年升高而受到关注。自噬作用参与RSA的发生和发展,自噬异常在RSA中的病理机制逐渐受到学术界的广泛关注。此外,自噬还参与母胎界面中滋养细胞侵袭和蜕膜化过程,因此调控RSA母胎界面自噬功能的平衡成为防治RSA的主要靶点之一。

摘要： 目的:探讨寿胎丸调控miR-374c-5p/ATG12信号轴减轻滋养细胞自噬治疗原因不明复发性自然流产(URSA的作用与机制。方法:收集正常早孕妇女(NP)和URSA患者绒毛组织各30例,Western blot检测LC3Ⅱ/Ⅰ、P62及ATG12蛋白表达;qRT-PCR检测ATG12 mRNA及miR-374c-5p表达。调控HTR-8/SVneo细胞miR-374c-5p表达,观察其对ATG12表达及细胞自噬的影响。体外观察寿胎丸含药血清对HTR-8/SVneo细胞miR-374c-5p、ATG12表达及自噬的影响;建立URSA小鼠模型,随机分为对照组、寿胎丸组、寿胎丸+INC组及寿胎丸+miR-374c-5p inhibitor组,观察各组胚胎吸收率,检测胎盘组织miR-374c-5p、ATG12及自噬相关蛋白表达。结果:与NP组相比,URSA患者绒毛组织LC3Ⅱ/Ⅰ比值及ATG12表达显著升高,P62表达显著降低,miR-374c-5p表达显著降低且与ATG12呈显著负相关。上调miR-374c-5p表达可显著降低ATG12表达及LC3Ⅱ/Ⅰ比值,提高P62蛋白表达;下调miR-374c-5p表达作用相反。双荧光素酶报告基因证实miR-374c-5p可与ATG12 mRNA 3'UTR直接结合。寿胎丸含药血清作用后,HTR-8/SVneo细胞miR-374c-5p及P62表达显著升高,ATG12及LC3Ⅱ/Ⅰ比值显著下降。与对照组相比,寿胎丸组小鼠胚胎吸收率明显降低,胎盘组织miR-374c-5p及P62表达显著升高,ATG12表达及LC3Ⅱ/Ⅰ比值显著下降;miR-374c-5p inhibitor可拮抗寿胎丸的妊娠保护作用。结论:miR-374c-5p表达降低可促进ATG12介导的滋养细胞自噬参与URSA发生过程,寿胎丸可靶向调节miR-374c-5p/ATG12信号轴减轻滋养细胞自噬进而治疗URSA。

摘要： 目的:分析胰岛素增强子结合蛋白(ISL1)在子痫前期(PE)发生中的作用。方法:收集胎盘组织,包括早孕胎盘绒毛(绒毛组,n=6)、正常孕妇组(n=3)和PE组(n=3);人滋养细胞系HTR8/SVneo(HTR8),分别转染ISL1过表达质粒、空载质粒、ISL1-SiRNA及Si-control,分别命名为ISL1过表达组(ISL1-OE组)、空载组(VE组)、ISL1敲降组(ISL1-Si组)及Si-control组。RT-PCR、Western Blot、免疫荧光和免疫组化检测ISL1 mRNA和蛋白表达及定位,伤口愈合实验、Transwell检测细胞的迁移、侵袭能力。结果:免疫组化染色显示ISL1主要在合体滋养细胞(STB)、细胞滋养细胞(CTB)及血管内皮细胞的核中表达,PE组孕妇胎盘中绒毛外滋养层细胞的ISL1表达明显低于正常孕妇组。与Si-control组比较,ISL1-Si组HTR8的迁移、侵袭增强(P<0.05);与VE组相比,ISL1-OE组迁移、侵袭减弱(P<0.05)。与Si-control组比较,ISL1-Si组HTR8中ZEB1和TGF-βmRNA表达水平降低(P<0.05)。结论:ISL1可能通过靶向ZEB1或TGF-β影响滋养层细胞的上皮间质转化,参与PE的发展。

摘要： 目的研究复发性自然流产(RSA)患者早期绒毛中细胞滋养层细胞中尾侧型同源转录因子2(CDX2)、GATA结合蛋白3(GATA3)、转录因子活化蛋白2C(TFAP2C)与肿瘤增殖抗原67(Ki67)表达的变化。方法选择RSA患者8例为RSA组,选择同期非意愿早期妊娠,要求行人工流产术的正常早孕者8例为正常流产组。应用免疫组化法检测两组绒毛组织中CDX2、GATA3、TFAP2C与Ki67蛋白的表达。结果RSA组免疫组化结果显示,CDX2和Ki67特异性表达于细胞滋养层细胞中,GATA3、TFAP2C主要表达于细胞滋养层细胞,部分合体滋养层细胞也有表达。与正常流产组比较,CDX2、GATA3与Ki67在RSA组的滋养层细胞中表达均明显减少(t分别=10.49、11.59、10.71,P均0.05)。结论RSA滋养细胞中的CDX2、GATA3与Ki67表达异常下调,滋养层细胞增殖和分化功能异常,可能是导致复发性自然流产的重要原因。

摘要： 子痫前期是妊娠20周后发生的以高血压、尿蛋白为主要临床表现的妊娠期特有疾病,属于妊娠期高血压疾病中的一种。子痫前期发病机制尚不明确,目前仍然是导致孕产妇和围产儿病死率增高的主要原因。细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)是参与Ras-Raf-MEK-ERK信号转导级联的相关蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶,ERK1/2调节滋养细胞在子痫前期的病理过程中起重要作用,可通过调控炎症免疫反应、激活氧化应激反应、抑制血管生成及促进滋养细胞侵袭、凋亡等相关机制参与子痫前期的发病,了解上述调控机制可为临床上子痫前期的预防和治疗提供新思路。

摘要： 高凝状态是正常妊娠的一个表现,原因是凝血因子增高及抗凝和纤溶能力降低。妊娠的成功需要这种高凝状态,以防止出血及出血引起的各种并发症[1]。妊娠期间可能出血的生理过程很多,从早期的受精卵着床、滋养细胞侵蚀及子宫螺旋动脉重塑,到分娩过程中不可避免的出血,妊娠高凝状态对迅速控制出血起着重要作用。妊娠的高凝状态也会给孕妇及胎儿带来一些不利影响。与非妊娠女性相比,妊娠期间发生静脉血栓栓塞症(VTE)的风险增加4~5倍。

摘要： 妊娠期间,随着胎儿组织植入子宫内膜,胎儿来源的滋养细胞和蜕膜细胞交互形成母胎界面。母胎界面中独特的局部免疫环境,在兼顾抵抗病原感染功能的同时,也实现了对胎儿这种半同源抗原的免疫赦免。作为一种非经典的MHC-I类分子,HLA-G在绒毛外滋养细胞(EVT)上大量特异性表达。HLA-G在母胎界面中发挥着调节螺旋动脉重塑、免疫耐受等作用;而滋养细胞HLA-G的表达异常与子痫前期(PE)、复发性自然流产(RSA)等不良妊娠结局有关。在此,我们总结了HLA-G对母胎界面中各种靶细胞的调节作用以阐明HLA-G发挥局部调节作用的内在机制。这些发现加深了我们对妊娠相关免疫机制的认识,也为妊娠相关疾病的治疗提供了线索。

摘要： 选择性宫内生长受限(sIUGR)是单绒毛膜性双胎严重并发症之一,增加围产期死亡率及发病率,并导致新生儿远期神经发育及认知能力受损,但其分子机制至今尚不明确。表观遗传学是指不改变DNA序列,通过某种方式使基因表达或细胞表现型出现可遗传的变化,最新研究发现sIUGR胎盘组织中存在DNA甲基化、非编码RNA调控及组蛋白修饰等表观遗传学调控方式的改变,证明表观遗传学调控机制参与了sIUGR的发病机制。因此,探索与sIUGR相关的表观遗传学调控机制对了解sIUGR的发病原因及确定临床诊疗策略可以提供新的思路。

摘要： 目的检测Wnt2在植入胎盘组织中的表达,分析Wnt2对滋养细胞凋亡、迁移和侵袭功能的影响。方法收集2020年7月至2021年1月于武汉大学中南医院妇产科行剖宫产的胎盘植入孕产妇胎盘组织15例(植入组)和正常孕产妇胎盘组织15例(对照组)。RT-PCR法和Western blot法检测胎盘组织中Wnt2表达水平,采用siRNA敲低HTR-8/Svneo细胞中Wnt2表达水平,流式细胞学法检测细胞凋亡,Transwell侵袭和迁移实验评估细胞的迁移和侵袭能力,RT-PCR法和Western blot法检测β-catenin、Bcl-2、Caspase-3、MMP-2和MMP-9表达水平。结果与对照组相比,植入组胎盘组织中Wnt2、MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白表达量均显著升高(均P<0.05)。转染敲低HTR-8/Svneo细胞Wnt2水平后,细胞凋亡率显著增加(P<0.05),细胞迁移和侵袭能力显著抑制(P<0.01),β-catenin、Bcl-2、MMP-2和MMP-9表达显著下降(均P<0.05),而Caspase-3表达显著升高(P<0.05)。结论植入胎盘组织中Wnt2蛋白表达显著升高,且Wnt2可能通过wnt/β-catenin信号通路参与了胎盘滋养细胞的凋亡、迁移和侵袭。

摘要： 早期先兆流产(EarlyThreatened Abortion,ETA)即发生在妊娠12周前,胎儿体重不足1000g而终止者.随着社会不断进步,人们生活方式及生活节奏的改变,先兆流产的发生率日趋上升.在中国,先兆流产的发生率高达30-40％,其中早期先兆流产达80％以上.早期先兆流产的病因病机错综复杂,从组织细胞学角度分析,滋养细胞的适度侵袭对孕卵成功植入子宫起重要作用.本研究以早孕人绒毛滋养细胞为载体，运用中药血清药理学观察不同高中低不同浓度的以杨家林教授的保胎经验方加减化裁为脾肾双补方的含药血清经p38MAPK-MMPs/TIMPs级联信号通路调控滋养细胞侵袭活力的机制研究，探究其对胚胎发育和维持妊娠的作用机理，为中医安胎提供理论支持和科学依据。

摘要： 本文以输卵管妊娠为研究对象，阐述了化瘀消癥杀胚中药复方对输卵管妊娠滋养细胞侵袭能力影响，研究表明，输卵管妊娠滋养细胞可表达MMPS，化瘀消癥杀胚中药复方和甲氨喋呤均能显著上调MMPS的表达，推测化淤消瘤杀胚中药通过上调MMP—2的表达，使输卵管蜕膜组织过度溶解，导致绒毛、蜕膜组织不同程度变性、坏死。

摘要： 目的:探讨化瘀消癥杀胚中药复方对输卵管妊娠滋养细胞凋亡能力的影响.rn 方法:①透射电镜观察化瘀消癥杀胚中药复方作用前后输卵管妊娠滋养细胞微观形态的变化;②采用Western Blot法观察化瘀消癥杀胚中药复方对输卵管妊娠滋养细胞FASL和caspase-3表达的影响.rn 结果:高、中、低不同剂量中药复方和输卵管妊娠滋养细胞共作用48h后,可显著增加凋亡蛋白FASL和caspase-3的表达,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05);中药高、中剂量组滋养细胞FASL和caspase-3表达的水平均与甲氨喋呤组无统计学差异,而中药低剂量组FASL和caspase-3的表达水平明显低于甲氨喋呤组(P＜0.05).rn 结论:化瘀消癥杀胚中药复方中药复方可显著增加输卵管妊娠滋养细胞凋亡相关蛋白Fasl和caspase-3的表达.

摘要： 目的:构建pSilencer4.1/HtrA1质粒,稳定转染人滋养细胞株HPT-8.rn 方法:免疫组化SABC方法检测HtrA1在HPT-8细胞中的表达; 构建pSilencer4.1/HtrA1质粒; 将pSilencer4.1/HtrA1质粒、pSilencer4.1空白质粒转染HPT-8,观察转染后细胞HtrAl表达.rn 结果:HPT-8约90％左右的细胞胞浆被染成棕黄色,胞核未见明显染色.转染pSilencer4.1/HtrA1质粒的HPT-8细胞的G418筛选浓度为200μg/ml.RT-PCR、western-blot法鉴定转染细胞HtrA1表达,发现转染Psilence-HtrA1重组质粒的细胞中HtrA1表达水平较空白质粒、正常细胞明显下降(P均＜0.05).空白质粒组、HPT-8组间吸光度值无显著差异(P＞0.05).rn 结论:成功构建稳定的、HtrA1表达被沉默的滋养细胞株HPT-8/pSilencer4.1-HtrA1,为下一步研究奠定基础.

摘要： 本文实验研究化癖消瘤杀胚中药复方对人输卵管妊娠滋养细胞增殖、凋亡的影响，从而为化癖消瘤杀胚中药复方治疗输卵管妊娠提供理论依据。

摘要： 目的：探讨模拟子痫前期患者血清浓度的游离脂肪酸对人早孕滋养细胞线粒体氧化应激损伤的影响。方法：用酶消化培养人早孕(孕6～8周)滋养细胞,传代长至70％～80％时,分别加入10％正常妊娠孕妇血清(正常孕妇组)、10％子痫前期孕妇血清(子痫前期组)及10％模拟子痫前期孕妇血清浓度的游离脂肪酸(游离脂肪酸组)培养24小时,检测滋养细胞线粒体氧化应激损伤水平。结果：子痫前期组的线粒体氧化应激损伤水平高于正常孕妇组，差异有统计学意义(P＜0.05);游离脂肪酸组的线粒体氧化应激损伤水平高于正常孕妇组，差异有统计学意义(P＜0.05);游离脂肪酸组的线粒体氧化应激损伤水平与子痈前期组差异无统计学意义(P＞0.05) 。结论：子痫前期患者血清可导致滋养细胞线粒体氧化应激损伤，可能是通过血清中的游离脂肪酸引起的。

摘要： 目的：研究足月小样儿胎盘及母体血清中胎盘特异性的microRNA517a(miR-517a)的表达,并初步探索滋养细胞侵袭在miR-517a调节出生体重的作用。方法：分别收集无妊娠并发症和合并症的足月正常出生体重儿(20例)及足月小样儿(10例)的新鲜胎盘组织及相应母体血清,用实时荧光定量PCR方法检测miR-517a的表达水平.以滋养细胞系HTR8/SVneo为研究对象,通过转染技术建立miR-517a高表达组及阴性对照组,通过Transwell侵袭试验检验miR-517a差异表达对两组细胞侵袭能力的影响。结果：miR-517a在足月小样儿胎盘、血清中表达均显著高于正常出生体重儿出生体重组；miR-517a高表达组滋养细胞侵袭能力明显低于正常对照组。结论：miR-517a是足月小样儿的可能原因之一，miR-517a导致低出生体重的机制可能是通过抑制滋养细胞侵袭。

摘要： 目的：Rho亚家族蛋白在不同来源滋养细胞间的表达特点。方法：基于JEG-3、JAR等两种滋养细胞系和人早孕绒毛体外培养等实验平台，应用Transwell,Western blot,RNAi等实验技术.研究并探讨Rho亚家族蛋白在EGF介导的人滋养细胞迁移中的作用及其机制。结果：在3种实验平台，EGF处理均使处于活性状态的RhoA和RhoC水平升高(P<0.01)，而RhoB水平无显著变化。结论：低浓度的EGF(1ng/ml)能够刺激JEG-3、JAR迁移上调，促进EVT细胞自培养绒毛组织的外生性迁移;EGF对滋养细胞迁移行为的上调依赖于RhoA和RhoC的表达和激活水平上调，而非RhoB。

摘要： 目的:采用基因克隆技术构建CLRs过表达/siRNA慢病毒载体感染胎盘来源的DC,探讨其对人滋养细胞侵袭力、粘附力及凋亡率的影响.方法:1.获取感染过表达CLRs基因慢病毒的DC和感染CLRs基因siRNA慢病毒的DC;2.人原代绒毛外细胞滋养细胞与感染过表达CLRs基因慢病毒的DC(CLRs基因过表达组)或感染CLRs基因siRNA慢病毒的DC(CLRs基因沉默组)共培养,以滋养细胞与未感染慢病毒DC共培养作为对照组;3.体外侵袭试验检测共培养前后滋养细胞的侵袭能力;4.AnnexinV/PI双染法检测共培养前后滋养细胞的凋亡情况;5.粘附能力实验检测共培养前后滋养细胞的粘附能力.结果:1.侵袭能力:与对照组相比,CLRs基因沉默后滋养细胞的侵袭能力明显减弱(P＜0.01);2.凋亡率:与未感染慢病毒的DC组相比,凋亡率明显增加;3.粘附能力:与对照组相比,DC细胞CIRs基因敲除后对滋养细胞粘附能力明显下降(P＜0.01).结论:DC表面CLRs基因敲除后,滋养细胞表现为凋亡率增加,侵袭能力及粘附能力明显减弱,提示DC表面CLRs基因是滋养细胞免疫损伤和子痫前期发病的重要机制之一.

摘要： 目的：探讨辅酶Q10(CoQ10)对人早孕滋养细胞线粒体氧化应激损伤的影响。方法：用酶消化培养人早孕(孕6～8周)滋养细胞,传代长至70％～80％时,加入10％子痫前期孕妇血清培养24小时后,取部分细胞检测滋养细胞线粒体氧化应激损伤水平:应用荧光染料法检测线粒体膜电位,应用荧光显微镜及酶标仪检测线粒体膜通道转换孔活性,应用实时荧光定量PCR检测线粒体DNA(mtDNA)表达。结果：CoQ10培养后细胞线粒体氧化应激损伤水平较未加CoQ10前降低，差异有统计学意义(P<0.05)。结论：CoQ10对线粒体氧化应激损伤具有保护性作用。

摘要： 本发明涉及一种用于分离滋养层细胞的核酸适配体、利用该核酸适配体分离滋养层细胞的方法以及利用该方法获得的滋养层细胞进行染色体拷贝数变异分析的方法，具体如下：先从宫颈脱落细胞中分离和纯化胎盘滋养层细胞，以滋养层细胞为起始样本提取胎儿来源的核酸，并利用数字PCR技术分别对目标易变染色体和参比染色体上特定单拷贝基因的拷贝数进行定量，通过分析两者比值来确定目标易变染色体的拷贝数变异特征。本发明选择特定序列的核酸适配体，配合免疫磁珠进行滋养层细胞的分离，极大缩短样本的处理时间，并利用数字PCR技术检测，设计特有的引物和探针，降低对PCR扩增效率的影响，因此与传统方法相比，该方法简便高效、快速准确。

摘要： 本发明公开了一种牛囊胚内细胞团细胞和滋养层细胞的差异染色方法，包括以下步骤：1)利用免疫染色方法，以抗CDX2单克隆抗体作为一抗，将其与特异表达在牛囊胚滋养层细胞的CDX2分子进行免疫结合；2)利用免疫染色方法，以红色荧光标记的能够与抗CDX2单克隆抗体结合的抗体作为二抗，对清洗后的结合有一抗的牛囊胚进行免疫染色；3)在免疫染色完成后，对牛囊胚进行整体的细胞核荧光染色，以形成差异染色。本发明在CDX2蛋白在滋养层细胞内特异性表达，而在内细胞团细胞上不表达的基础上，这样利用基于CDX2分子的红色免疫染色和DAPI细胞核蓝色染色来进行差异染色，准确率为100％，而且图片清晰漂亮。

摘要： 本发明涉及一种用于分离滋养层细胞的核酸适配体、利用该核酸适配体分离滋养层细胞的方法以及利用该方法获得的滋养层细胞进行染色体拷贝数变异分析的方法，具体如下：先从宫颈脱落细胞中分离和纯化胎盘滋养层细胞，以滋养层细胞为起始样本提取胎儿来源的核酸，并利用数字PCR技术分别对目标易变染色体和参比染色体上特定单拷贝基因的拷贝数进行定量，通过分析两者比值来确定目标易变染色体的拷贝数变异特征。本发明选择特定序列的核酸适配体，配合免疫磁珠进行滋养层细胞的分离，极大缩短样本的处理时间，并利用数字PCR技术检测，设计特有的引物和探针，降低对PCR扩增效率的影响，因此与传统方法相比，该方法简便高效、快速准确。

摘要： 一种以工程化红细胞作为滋养层细胞体外高效扩增NK细胞的方法，属于细胞基因治疗领域，包括使用低浓度戊二醛醛化红细胞表面蛋白，并在红细胞表面标记多种不同蛋白组合，包括IL‑15,4‑1BB，CD335单抗以及CD2单抗等，使用工程化红细胞作为滋养层细胞在体外反复刺激PBMC可以产生大量NK细胞，以工程化红细胞作为滋养层细胞体外高效扩增NK细胞具有如下优点：一、避免了K562等肿瘤细胞系的使用能够确保NK细胞制备过程更加安全，二、使用工程化红细胞反复刺激能够在体外获得大量高杀伤活性NK细胞，获得NK细胞数量比使用因子法能够增加30%以上。此种制备安全足量的NK细胞方法能够更加符合临床使用需求。

摘要： 本发明公开了一种牛囊胚内细胞团细胞和滋养层细胞的差异染色方法，包括以下步骤：1)利用免疫染色方法，以抗CDX2单克隆抗体作为一抗，将其与特异表达在牛囊胚滋养层细胞的CDX2分子进行免疫结合；2)利用免疫染色方法，以红色荧光标记的能够与抗CDX2单克隆抗体结合的抗体作为二抗，对清洗后的结合有一抗的牛囊胚进行免疫染色；3)在免疫染色完成后，对牛囊胚进行整体的细胞核荧光染色，以形成差异染色。本发明在CDX2蛋白在滋养层细胞内特异性表达，而在内细胞团细胞上不表达的基础上，这样利用基于CDX2分子的红色免疫染色和DAPI细胞核蓝色染色来进行差异染色，准确率为100％，而且图片清晰漂亮。

摘要： 本文公开了体外产生的前体调节性细胞滋养层细胞及其组合物。本文还公开了通过利用本文公开的细胞治疗障碍或病症的方法。

摘要： 本申请涉及基因工程的技术领域，具体公开了一种滋养层细胞及其在扩增人NK细胞中的应用。该滋养层细胞，表达细胞因子，所述细胞因子包括CD80、CD70、CD86、4‑1BBL、CD40、CD58、CD83和MICA；所述滋养层细胞为NIH 3T3细胞；以及用于制备该滋养层细胞的细胞因子慢病毒载体及利用细胞因子慢病毒载体制备的细胞因子慢病毒；以及利用该滋养层细胞制备的NK细胞扩增培养基；以及该滋养层在扩增NK细胞中的应用。本申请制备的NK细胞具有更好的安全性和理想的杀伤数据。

摘要： 本发明提供一种免疫细胞培养方法以及人工滋养细胞在免疫细胞培养中的用途，在免疫细胞培养过程中加入表达细胞生长因子和共刺激分子的滋养细胞，利用滋养细胞表面的免疫细胞生长因子和共刺激信号，不断刺激免疫细胞，而达到促使免疫细胞扩增的作用。由于直接加入滋养细胞，而非单独加入免疫细胞生长因子和细胞共刺激分子信号蛋白，因此，既延长细胞生长因子和共刺激信号的作用时间，又降低免疫细胞生产成本，而且培养的免疫细胞还具有增值效果好、抗原专一性的T细胞比例高、专一性高、杀伤肿瘤细胞的功能强等优点，为免疫细胞治疗癌症的推广和效果的提高起到推动作用。

摘要： 本发明提供一种免疫细胞培养方法以及人工滋养细胞在免疫细胞培养中的用途，在免疫细胞培养过程中加入表达细胞生长因子和共刺激分子的滋养细胞，利用滋养细胞表面的免疫细胞生长因子和共刺激信号，不断刺激免疫细胞，而达到促使免疫细胞扩增的作用。由于直接加入滋养细胞，而非单独加入免疫细胞生长因子和细胞共刺激分子信号蛋白，因此，既延长细胞生长因子和共刺激信号的作用时间，又降低免疫细胞生产成本，而且培养的免疫细胞还具有增值效果好、抗原专一性的T细胞比例高、专一性高、杀伤肿瘤细胞的功能强等优点，为免疫细胞治疗癌症的推广和效果的提高起到推动作用。

摘要： 本发明提供了一种用于培养NK细胞的滋养细胞的制备方法，主要包括验证常规纯因子培养法培养NK细胞的增殖效果以及得出相应增殖比例；制备过表达IL‑15、4‑1bbl的K562细胞；制备滋养层细胞等步骤。本发明提供的滋养细胞的制备方法，可以消除K562癌细胞作为滋养层细胞带来的风险，可以大量增殖高纯度、高活率的NK细胞。