北京长白杂交猪IgG H链基因CH2-CH3的克隆、序列分析及表达质粒构建

李新生; 高凤山; 李云岗; 崔保安; 陈红英; 崔沛; 夏春

首页> 中文期刊> 《河南农业大学学报》 >北京长白杂交猪IgG H链基因CH2-CH3的克隆、序列分析及表达质粒构建

北京长白杂交猪IgG H链基因CH2-CH3的克隆、序列分析及表达质粒构建

开具论文收录证明 >>

期刊封面封底目录下载 >>

文献代查 >>

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

根据GenBank中注册的猪IgG H链基因cDNA CH2 CH3序列(SSU03780),设计了含Kpn Ⅰ和HindⅢ酶切位点的一对引物,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法从北京长白杂交猪肠系膜淋巴结细胞扩增猪IgG H链基因CH2-CH3序列.将PCR产物纯化回收后,插入到含LacZ基因的克隆载体pGEM-T Easy中,转化大肠杆菌JM 109感受态细胞,经KpnⅠ和HindⅢ双酶切及PCR鉴定,筛选出阳性克隆.将所克隆的目的片断亚克隆到原核表达载体pQE 30,构建重组质粒pQE 30/PIgG CH2-CH3.将重组表达质粒转化大肠杆菌JM 109感受态细胞,筛选阳性克隆,经IPTG诱导表达后,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析.结果表明,本研究克隆了猪IgG H链基因CH2-CH3序列,全长663 bp,编码221个氨基酸,利用Gentyx version 6.0软件将CH2-CH3基因的核苷酸序列与GenBank中的参考序列比较,其核苷酸序列同源率为99.551%,推导的氨基酸序列同源率为100%.将pQE 30/PIgG CH2-CH3转化JM 109感受态细胞,表达的融合蛋白相对分子质量约为26.95 ku,经IPTG诱导2 h,表达量约占菌体总蛋白41.5%.

著录项

来源
《河南农业大学学报》 |2006年第1期|1-6|共6页
作者
李新生; 高凤山; 李云岗; 崔保安; 陈红英; 崔沛; 夏春;
展开▼
作者单位

中国农业大学动物医学院;

北京;

100094;

河南农业大学牧医工程学院;

河南;

郑州;

450002;

中国农业大学动物医学院;

北京;

100094;

中国农业大学动物医学院;

北京;

100094;

河南农业大学牧医工程学院;

河南;

郑州;

450002;

河南农业大学牧医工程学院;

河南;

郑州;

450002;

河南省兽医防治站;

河南;

郑州;

450002;

中国农业大学动物医学院;

北京;

100094;

展开▼
原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类畜禽遗传、选种、育种;
关键词
猪IgG; H链基因; CH2和CH3; 基因克隆; DNA序列分析; 原核表达;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 商品长白杂交猪IgA H链CH1-CH3区基因的克隆与表达 [J] . 李云岗 ,孙稳平 ,李新生 . 畜牧与兽医 . 2007,第10期
2. 大蒜蒜氨酸酶基因克隆与序列分析及毕赤酵母表达质粒的构建 [J] . 吴晓莉 ,许健 ,张婷 . 吉林农业大学学报 . 2010,第003期
3. 溶藻弧菌HY9901鞭毛蛋白flaC基因的克隆和序列分析及真核表达质粒的构建 [J] . 梁海鹰 ,夏立群 ,吴灶和 . 吉首大学学报（自然科学版） . 2010,第003期
4. 哈维氏弧菌FlaA基因的克隆、序列分析及真核表达质粒的构建 [J] . 庄轩 ,覃映雪 ,苏永全 . 海洋学报（中文版） . 2007,第006期
5. 鸭MHC-Ⅰα链胞外区成熟肽基因的克隆、序列分析及表达载体构建 [J] . 孙凯 ,李新生 ,崔保安 . 西北农林科技大学学报（自然科学版） . 2010,第002期
6. 鸭MHC—Ⅰα链胞外区成熟肽基因克隆、序列分析及其表达载体的构建 [C] . 孙凯 ,李新生 ,崔保安 . 中国畜牧兽医学会2009学术年会 . 2009
7. H3N2亚型猪流感病毒NS1基因的克隆、序列分析及其真核表达质粒的构建 [A] . 高敏 . 2006

北京长白杂交猪IgG H链基因CH2-CH3的克隆、序列分析及表达质粒构建

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅