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鄂尔多斯高原碱湖钝顶螺旋藻SOD的纯化与性质研究

         

摘要

以鄂尔多斯高原碱湖特有的钝顶螺旋藻为材料,经超声破碎、硫酸铵分步盐析、离子交换层析及凝胶过滤,纯化得到SOD酶,经PAGE检测为1条带,所得酶液平均比活为2 078 U/mg,(总活力)回收率为19.9%.对SOD酶的PAGE电泳条带进行活性染色,亮斑清晰整齐;H2O2处理对照显示该酶活性明显受到抑制,KCN处理对照显示酶活性不受影响,初步判断为Fe-SOD;又经金属元素分析,确认为Fe-SOD.经SDS-PAGE测定,亚基相对分子量为20 kD,经PG-PAGE测定,全酶分子量为54 kD,据分子量推断全酶应为三聚体分子.该酶在紫外区275.5 nm有最大光吸收.在磷酸缓冲液中酶活力的最适pH为8.1,最适温度为25℃;酶活性的pH稳定范围为5~10,40℃以上酶活力开始明显下降.酶在室温下存放9 d后活力仍保持不变.

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